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PCR試劑盒
豬(zhu)病PCR試劑盒
50T豬(zhu)瘟(wen)病毒(du)(CSFV)核(he)酸試劑盒(熒光-PCR法(fa))





產品簡(jian)介
豬(zhu)瘟(wen)病毒(du)(CSFV)核(he)酸試劑盒(熒光-PCR法(fa))是(shi)我(wo)司實(shi)時(shi)熒光探(tan)針(zhen)法(fa)試劑盒,種(zhong)類齊(qi)全(quan),精(jing)準(zhun)高效,現貨供應(ying),歡(huan)迎廣大新老(lao)客(ke)戶(hu)前來選(xuan)購(gou)。
產品分(fen)類
【產品名稱】
商(shang)品名稱:豬(zhu)瘟(wen)病毒(du)(CSFV)核(he)酸試劑盒(熒光-PCR法(fa))
【包(bao)裝規(gui)格】25T/盒、50T/盒
【檢(jian)驗原理(li)】本(ben)試劑盒采(cai)用(yong)TaqMan 探(tan)針(zhen)法(fa)實(shi)時(shi)熒光PCR 技術(shu),根(gen)據 豬(zhu)瘟(wen)病毒(du)(CSFV)基(ji)因設(she)計特(te)異性(xing)引物和(he)熒光探(tan)針(zhen),用(yong)熒光PCR技術(shu)對豬(zhu)瘟(wen)病毒(du)(CSFV)的核酸進行(xing)體外(wai)擴(kuo)增檢(jian)測,用(yong)於臨床上對可疑感(gan)染(ran)病料(liao)的病原學(xue)診(zhen)斷(duan)。
【試劑組成】
包(bao)裝規(gui)格 | 25T/盒 | 50T/盒 |
反應(ying)液(ye) | 500μL×1 管(guan) | 500μL×2 管(guan) |
酶(mei)液 | 25μL×1 管(guan) | 50μL×1 管(guan) |
陽(yang)性質(zhi)控品 | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
陰(yin)性質(zhi)控品 | 250μL ×1 管(guan) | 250μL ×1 管(guan) |
說(shuo)明:不(bu)同(tong)批(pi)號(hao)的試劑盒組分(fen)不可交互(hu)使(shi)用(yong)
【儲存(cun)條件(jian)及有效期(qi)】
-20℃±5℃,避(bi)光保(bao)存(cun)、運(yun)輸(shu)、反復凍融次數不(bu)超(chao)過(guo) 5 次,有效期(qi) 12 個(ge)月。
【適(shi)用(yong)儀器(qi)】 ABI7500、安(an)捷倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系列(lie)熒光定(ding)量(liang)PCR 檢(jian)測儀。
【使(shi)用(yong)方(fang)法】
1.樣品(pin)處理(li)(樣本(ben)處理(li)區(qu))
核(he)酸提(ti)取(qu) 推(tui)薦采(cai)用(yong)核(he)酸提取(qu)或(huo)純(chun)化(hua)試劑(磁(ci)珠(zhu)法或(huo)離(li)心柱法(fa))進(jin)行(xing)核酸(suan)提取(qu), 請(qing)按照試劑說(shuo)明書進行(xing)操作(zuo)。
2.試劑配制(zhi)(試劑準(zhun)備區(qu))根(gen)據待檢(jian)測樣本(ben)總(zong)數,設(she)所(suo)需要的PCR 反應(ying)管(guan)管(guan)數為(wei) N(N=樣本(ben)數+1 管(guan)陰性(xing)對照+1 管(guan)陽性(xing)對照;反應(ying)管(guan)數每(mei)滿(man)10 份(fen),多配制(zhi)1 份(fen)),每(mei)測試反應(ying)體系配制(zhi)如(ru)下表(biao):
試劑 | 反應(ying)液(ye) | 酶(mei)液 |
用(yong)量(liang)(樣本(ben)數為(wei) N) | 19μL | 1μL |
將(jiang)混合(he)好的測試反應(ying)液(ye)分(fen)裝到(dao) PCR 反應(ying)管(guan)中(zhong),20μL/管(guan)。
3.加(jia)樣(樣本(ben)處理(li)區(qu))將(jiang)步驟(zhou) 1 提(ti)取(qu)的核酸、陽性(xing)質(zhi)控品、陰(yin)性(xing)質(zhi)控品各(ge)取(qu)5μL,分(fen)別加(jia)入(ru)相應(ying)的反應(ying)管(guan)中(zhong),蓋(gai)好管蓋(gai),混勻(yun),短暫(zan)離(li)心。
4.PCR 擴(kuo)增(核(he)酸擴(kuo)增區(qu))
2.1 將(jiang)待檢(jian)測反應(ying)管(guan)置於熒光定(ding)量(liang) PCR 儀反應(ying)槽(cao)內(nei);
2.2 設(she)置好通道、樣品(pin)信(xin)息(xi),反應(ying)體系設(she)置為(wei) 25μL;熒光通(tong)道選(xuan)擇(ze):檢(jian)測通(tong)道(dao)(Reporter Dye)FAM,淬(cui)滅通(tong)道(dao)(Quencher Dye)NONE,ABI 系列(lie)儀器(qi)請(qing)勿(wu)選(xuan)擇(ze) ROX 參(can)比(bi)熒光,選(xuan)擇(ze) None 即(ji)可。
2.3 推(tui)薦循(xun)環參(can)數設(she)置:
步(bu)驟 | 循(xun)環數 | 溫(wen)度(du) | 時(shi)間 | 收(shou)集熒光信(xin)號 |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否 |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否 |
60℃ | 30sec | 是(shi) |
5.結(jie)果(guo)分析判(pan)定(ding)
5.1結(jie)果(guo)分析條(tiao)件(jian)設(she)定(ding)(請(qing)參(can)照各(ge)儀器(qi)使(shi)用(yong)說(shuo)明書進行(xing)設(she)置,以(yi)分(fen)析 ABI7500 儀器(qi)為(wei)例(li)) 反應(ying)結(jie)束(shu)後自(zi)動(dong)保(bao)存(cun)結果(guo),根(gen)據分析後圖(tu)像(xiang)調節(jie) Baseline 的 Start 值(zhi)、End 值(zhi)以及(ji) Threshold 值(zhi)(用(yong)戶(hu)可根(gen) 據實(shi)際(ji)情況(kuang)自(zi)行(xing)調整(zheng),Start 值(zhi)可設(she)在 3~15、End 值(zhi)可設(she)在 5~20,使(shi)閾值(zhi)線(xian)位(wei)於擴(kuo)增曲線(xian)指(zhi)數期(qi),陰性質(zhi)控 品(pin)的擴(kuo)增曲線(xian)平直(zhi)或(huo)低於閾值(zhi)線(xian)),點擊(ji) Analyze 自(zi)動(dong)獲(huo)得分(fen)析(xi)結(jie)果(guo)。
5.2結(jie)果(guo)判(pan)斷(duan)
陽(yang)性:檢(jian)測通(tong)道(dao)Ct 值(zhi)≤40,且曲線(xian)有明顯(xian)的指(zhi)數增(zeng)長曲線(xian);
陰(yin)性:樣本(ben)檢(jian)測結(jie)果(guo)無Ct 值(zhi),且無特異(yi)性擴(kuo)增曲線(xian);
可疑:樣本(ben)檢(jian)測結(jie)果(guo)40<Ct 值(zhi)≤45,建議重復檢(jian)測,如(ru)果(guo)檢(jian)測通(tong)道(dao)仍(reng)為(wei)40值(zhi)≤45,且曲線(xian)有明顯(xian)的增長 曲線(xian),判(pan)定(ding)為(wei)陽性,否則(ze)為(wei)陰性(xing)。
5.3 質(zhi)控標準(zhun) 陰(yin)性質(zhi)控品:無特異(yi)性擴(kuo)增曲線(xian)或(huo)無Ct 值(zhi)顯(xian)示;陽(yang)性質(zhi)控品:擴(kuo)增曲線(xian)有明顯(xian)指(zhi)數增(zeng)長期,且 Ct 值(zhi)≤32;以(yi)上條(tiao)件(jian)應(ying)同(tong)時滿(man)足,否則(ze)實(shi)驗(yan)視(shi)為(wei)無效。
【豬(zhu)瘟(wen)病毒(du)(CSFV)核(he)酸試劑盒(熒光-PCR法(fa))註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)】
1.所(suo)有操作嚴(yan)格按(an)照說(shuo)明書進行(xing);
2.試劑盒內各(ge)種(zhong)組(zu)分(fen)使用(yong)前應(ying)自(zi)然(ran)融(rong)化(hua),完(wan)quan混(hun)勻並短(duan)暫(zan)離(li)心;
3.反應(ying)液(ye)應(ying)避(bi)光保(bao)存(cun);
4.反應(ying)中(zhong)盡(jin)量避(bi)免氣泡(pao)存(cun)在,管(guan)蓋(gai)需蓋(gai)緊;
5.使(shi)用(yong)壹次性(xing)吸(xi)頭、壹次性(xing)手(shou)套(tao)和(he)各(ge)區(qu)專用(yong)工作(zuo)服(fu);
6.樣本(ben)處理(li)、試劑配制(zhi)、加(jia)樣需(xu)在不(bu)同(tong)區(qu)進行(xing),以免(mian)交叉(cha)汙染(ran);
7.實(shi)驗(yan)完(wan)畢(bi)後(hou)用(yong) 10%次氯(lv)酸(suan)或(huo) 75%酒(jiu)精(jing)或(huo)紫(zi)外燈(deng)處理(li)工作(zuo)臺(tai)和(he)移液器(qi);
8.試劑盒裏(li)所(suo)有物品應(ying)視(shi)為(wei)汙染(ran)物(wu)對待,並按(an)照《微生(sheng)物生(sheng)物醫(yi)學(xue)實(shi)驗(yan)室生(sheng)物安(an)全(quan)通(tong)則(ze)》進行(xing)處理(li)。
我(wo)司的實(shi)時(shi)熒光探(tan)針(zhen)法(fa)試劑盒種(zhong)類齊(qi)全(quan)(涵蓋(gai)禽病、豬(zhu)病、馬(ma)牛羊(yang)病和(he)水產動(dong)物(wu)病原體檢(jian)測),精(jing)準(zhun)高效,多(duo)重(zhong)檢(jian)測(壹重(zhong)、雙(shuang)重、三重),現貨(huo)供應(ying)歡(huan)迎廣大新老(lao)客(ke)戶(hu)前來選(xuan)購(gou)。
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