產品(pin)簡(jian)介

豬(zhu)勞(lao)森氏(shi)胞內(nei)菌(LI)核酸(suan)試(shi)劑盒(熒(ying)光-PCR法)是我(wo)司實(shi)時(shi)熒(ying)光探(tan)針(zhen)法試劑盒,種類(lei)齊全,精準(zhun)高(gao)效(xiao)，現貨供(gong)應(ying),歡迎(ying)廣(guang)大新老(lao)客戶(hu)前(qian)來(lai)選購(gou)。

【產品(pin)名(ming)稱(cheng)】

商品名稱：豬勞(lao)森氏(shi)胞內(nei)菌(LI)核酸(suan)試(shi)劑盒(熒光-PCR法)

【包(bao)裝(zhuang)規(gui)格】25T/盒、50T/盒

【檢(jian)驗原理】本(ben)試(shi)劑盒采(cai)用(yong)TaqMan 探針(zhen)法實(shi)時(shi)熒(ying)光PCR 技(ji)術(shu)，根(gen)據(ju) 豬(zhu)勞(lao)森氏(shi)胞內(nei)菌(LI)基因(yin)設計(ji)特(te)異性(xing)引(yin)物和(he)熒光探(tan)針(zhen)，用(yong)熒光PCR技(ji)術(shu)對豬(zhu)勞(lao)森氏(shi)胞內(nei)菌(LI)的核酸(suan)進(jin)行(xing)體(ti)外(wai)擴(kuo)增(zeng)檢(jian)測，用(yong)於臨床(chuang)上對(dui)可疑感染(ran)病(bing)料的病原學診斷。

【試劑組成(cheng)】

說明(ming)：不同批號的試劑盒組分不可交互(hu)使用(yong)

【儲存條件及(ji)有(you)效(xiao)期】

 -20℃±5℃，避(bi)光保(bao)存、運(yun)輸(shu)、反(fan)復(fu)凍融(rong)次(ci)數不超(chao)過(guo) 5 次(ci)，有(you)效(xiao)期 12 個月(yue)。

【適用(yong)儀器】 ABI7500、安捷(jie)倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系(xi)列熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR 檢(jian)測儀(yi)。

【使用(yong)方法】

1.樣品(pin)處(chu)理（樣(yang)本(ben)處(chu)理區）

 核酸(suan)提(ti)取(qu) 推(tui)薦(jian)采(cai)用(yong)核酸(suan)提(ti)取(qu)或(huo)純(chun)化試(shi)劑（磁珠法或離(li)心(xin)柱法）進行(xing)核酸(suan)提(ti)取(qu)， 請按(an)照(zhao)試(shi)劑說明(ming)書進(jin)行(xing)操作(zuo)。

2.試劑配制(zhi)（試劑準備(bei)區）根(gen)據(ju)待(dai)檢(jian)測樣(yang)本(ben)總(zong)數，設所(suo)需(xu)要(yao)的PCR 反(fan)應(ying)管(guan)管數為(wei) N(N=樣(yang)本(ben)數+1 管陰性(xing)對照(zhao)+1 管陽(yang)性(xing)對照(zhao)；反(fan)應(ying)管(guan)數每(mei)滿(man)10 份，多(duo)配制(zhi)1 份)，每(mei)測試(shi)反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)配制(zhi)如下表(biao)：

將混(hun)合(he)好(hao)的測試(shi)反(fan)應(ying)液(ye)分裝(zhuang)到 PCR 反(fan)應(ying)管(guan)中，20μL/管(guan)。

3.加樣(yang)（樣(yang)本(ben)處(chu)理區）將(jiang)步(bu)驟(zhou) 1 提(ti)取(qu)的核酸(suan)、陽(yang)性(xing)質(zhi)控品、陰性(xing)質(zhi)控品各取5μL，分(fen)別(bie)加(jia)入相應(ying)的反(fan)應(ying)管(guan)中，蓋(gai)好(hao)管蓋(gai)，混(hun)勻(yun)，短(duan)暫離(li)心(xin)。

4.PCR 擴(kuo)增(zeng)（核酸(suan)擴(kuo)增(zeng)區）

2.1 將(jiang)待檢(jian)測反(fan)應(ying)管(guan)置(zhi)於熒光定(ding)量(liang) PCR 儀反(fan)應(ying)槽(cao)內(nei)；

2.2 設置(zhi)好(hao)通道、樣品(pin)信息(xi)，反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)設置(zhi)為(wei) 25μL；熒(ying)光通道選擇：檢(jian)測通道（Reporter Dye）FAM，淬滅通道（Quencher Dye）NONE，ABI 系(xi)列儀(yi)器請勿(wu)選擇 ROX 參(can)比熒(ying)光，選擇 None 即可。

2.3 推薦(jian)循(xun)環(huan)參(can)數設置(zhi)：

5.結果(guo)分(fen)析(xi)判(pan)定

5.1結果(guo)分(fen)析(xi)條件設定(ding)（請參(can)照各儀器使用(yong)說明(ming)書進(jin)行(xing)設置(zhi)，以分析(xi) ABI7500 儀器(qi)為(wei)例(li)） 反(fan)應(ying)結束(shu)後(hou)自(zi)動保(bao)存結果(guo)，根(gen)據(ju)分(fen)析(xi)後圖(tu)像調(tiao)節 Baseline 的 Start 值、End 值(zhi)以(yi)及(ji) Threshold 值(zhi)（用(yong)戶可根(gen) 據(ju)實(shi)際(ji)情(qing)況自(zi)行(xing)調(tiao)整，Start 值(zhi)可設在 3～15、End 值可設在 5～20，使閾(yu)值線(xian)位(wei)於(yu)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線指數期，陰性(xing)質(zhi)控 品的擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線平直或(huo)低於閾(yu)值線(xian)），點擊 Analyze 自(zi)動獲得(de)分析(xi)結果(guo)。

5.2結果(guo)判(pan)斷

陽(yang)性(xing)：檢(jian)測通道Ct 值≤40，且曲(qu)線有(you)明(ming)顯的指數增(zeng)長(chang)曲(qu)線；

陰性(xing)：樣本(ben)檢(jian)測結果(guo)無Ct 值(zhi)，且無特(te)異性(xing)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線；

可疑：樣(yang)本(ben)檢(jian)測結果(guo)40＜Ct 值≤45，建(jian)議重(zhong)復(fu)檢(jian)測，如(ru)果(guo)檢(jian)測通道仍為(wei)40值(zhi)≤45，且(qie)曲(qu)線有(you)明(ming)顯的增(zeng)長(chang) 曲(qu)線，判(pan)定為(wei)陽(yang)性(xing)，否則(ze)為(wei)陰性(xing)。

5.3 質(zhi)控標(biao)準 陰性(xing)質(zhi)控品：無特(te)異性(xing)擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線或(huo)無Ct 值顯示；陽(yang)性(xing)質(zhi)控品：擴(kuo)增(zeng)曲(qu)線有(you)明(ming)顯指數增(zeng)長(chang)期，且 Ct 值(zhi)≤32；以上條件應同時滿(man)足(zu)，否則(ze)實(shi)驗視(shi)為(wei)無效(xiao)。

3. 檢(jian)測方(fang)法的局限性(xing)

1. 樣(yang)本(ben)檢(jian)測結果(guo)與(yu)樣(yang)本(ben)收集、處理、運(yun)送(song)以及(ji)保存質(zhi)量有(you)關(guan)；

2. 樣(yang)本(ben)提(ti)取(qu)過(guo)程中沒有(you)控(kong)制(zhi)好(hao)交叉(cha)汙染，會出現假陽(yang)性(xing)結果(guo)；

3. 陽(yang)性(xing)對照(zhao)、擴(kuo)增(zeng)產(chan)物泄漏(lou)，會導(dao)致(zhi)假陽(yang)性(xing)結果(guo)；

4. 病(bing)原體在流(liu)行(xing)過(guo)程中基因(yin)突變、重(zhong)組，會導(dao)致(zhi)假陰性(xing)結果(guo)；

5. 不同的提(ti)取(qu)方(fang)法存在提(ti)取(qu)效(xiao)率(lv)差異，會導(dao)致(zhi)假陰性(xing)結果(guo)；

6. 試(shi)劑運(yun)輸(shu)，保(bao)存不當(dang)或(huo)試(shi)劑配制(zhi)不準確引(yin)起的試劑檢(jian)測效(xiao)能下降，出現假陰性(xing)或定(ding)量(liang)檢(jian)測不準確的結果(guo)；

7. 本(ben)檢(jian)測結果(guo)僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，如須(xu)確診請結合(he)臨床(chuang)癥狀以(yi)及(ji)其他檢(jian)測手(shou)段(duan)。

【豬勞(lao)森氏(shi)胞內(nei)菌(LI)核酸(suan)試(shi)劑盒(熒(ying)光-PCR法)註(zhu)意事(shi)項】

1.所有(you)操作(zuo)嚴(yan)格按(an)照(zhao)說明(ming)書進(jin)行(xing)；

2.試(shi)劑盒內(nei)各種組分使用(yong)前(qian)應(ying)自(zi)然(ran)融(rong)化，完(wan)quan混(hun)勻(yun)並(bing)短(duan)暫離(li)心(xin)；

3.反(fan)應(ying)液(ye)應避(bi)光保(bao)存；

4.反(fan)應(ying)中盡量避(bi)免(mian)氣(qi)泡存在，管(guan)蓋(gai)需蓋(gai)緊；

5.使用(yong)壹(yi)次(ci)性(xing)吸頭、壹(yi)次(ci)性(xing)手(shou)套(tao)和各區專(zhuan)用(yong)工(gong)作(zuo)服(fu)；

6.樣本(ben)處(chu)理、試(shi)劑配制(zhi)、加樣(yang)需(xu)在不同區進行(xing)，以(yi)免(mian)交(jiao)叉(cha)汙染；

7.實(shi)驗完(wan)畢(bi)後用(yong) 10%次(ci)氯酸或(huo) 75%酒精或(huo)紫(zi)外燈(deng)處理工(gong)作(zuo)臺(tai)和移(yi)液(ye)器；

8.試(shi)劑盒裏(li)所(suo)有(you)物品(pin)應視(shi)為(wei)汙染物對(dui)待，並按(an)照(zhao)《微(wei)生(sheng)物生(sheng)物醫(yi)學(xue)實(shi)驗室(shi)生(sheng)物安(an)全通則》進行(xing)處(chu)理。

我(wo)司的實(shi)時(shi)熒(ying)光探(tan)針(zhen)法試劑盒種類(lei)齊全（涵蓋(gai)禽病、豬病(bing)、馬(ma)牛羊(yang)病和(he)水產動物病(bing)原體檢(jian)測），精準(zhun)高(gao)效(xiao)，多(duo)重(zhong)檢(jian)測（壹(yi)重(zhong)、雙(shuang)重(zhong)、三(san)重(zhong)），現貨供(gong)應歡迎(ying)廣(guang)大新老(lao)客戶(hu)前(qian)來(lai)選購(gou)。