產(chan)品(pin)簡介(jie)

偽狂(kuang)犬(quan)病毒野(ye)毒(du)株(PRV-gE)核酸(suan)試(shi)劑(ji)盒(he)是我司實時熒(ying)光(guang)探(tan)針法(fa)試(shi)劑(ji)盒(he),種(zhong)類(lei)齊(qi)全,精準高效(xiao)，現(xian)貨(huo)供應(ying),歡(huan)迎(ying)廣(guang)大新(xin)老(lao)客戶前來(lai)選購。

【產(chan)品(pin)名(ming)稱】

商(shang)品(pin)名(ming)稱：偽(wei)狂(kuang)犬(quan)病毒野(ye)毒(du)株(PRV-gE)核(he)酸(suan)試(shi)劑(ji)盒(he)(熒(ying)光(guang)-PCR法)

【包(bao)裝(zhuang)規(gui)格】25T/盒(he)、50T/盒(he)

【檢驗原理】本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)采(cai)用TaqMan 探(tan)針法(fa)實時熒(ying)光(guang)PCR 技術，根(gen)據(ju) 偽(wei)狂(kuang)犬(quan)病毒野(ye)毒(du)株(PRV-gE)基(ji)因(yin)設計特(te)異(yi)性(xing)引(yin)物(wu)和(he)熒(ying)光(guang)探(tan)針，用熒(ying)光(guang)PCR技術對偽(wei)狂(kuang)犬(quan)病毒野(ye)毒(du)株(PRV-gE)的(de)核(he)酸(suan)進(jin)行(xing)體外(wai)擴增(zeng)檢測，用於臨(lin)床(chuang)上對(dui)可(ke)疑感(gan)染(ran)病料的(de)病原學(xue)診斷。

【試(shi)劑(ji)組成】

說(shuo)明：不同批(pi)號(hao)的試(shi)劑(ji)盒(he)組分不可交互(hu)使用

【儲(chu)存條(tiao)件(jian)及有(you)效(xiao)期】

 -20℃±5℃，避(bi)光(guang)保存、運輸(shu)、反(fan)復(fu)凍融次(ci)數不超(chao)過 5 次(ci)，有(you)效(xiao)期 12 個(ge)月(yue)。

【適用儀(yi)器(qi)】 ABI7500、安捷(jie)倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等(deng)系(xi)列熒(ying)光(guang)定(ding)量PCR 檢測儀(yi)。

【使用方(fang)法】

1.樣品(pin)處(chu)理（樣本處(chu)理區）

 核(he)酸(suan)提取(qu) 推(tui)薦采用核酸(suan)提取(qu)或(huo)純化試(shi)劑(ji)（磁(ci)珠(zhu)法(fa)或(huo)離心柱(zhu)法）進(jin)行(xing)核(he)酸(suan)提取(qu)， 請(qing)按(an)照(zhao)試(shi)劑(ji)說(shuo)明書(shu)進(jin)行(xing)操作。

2.試(shi)劑(ji)配(pei)制（試(shi)劑(ji)準備區）根(gen)據(ju)待(dai)檢測樣本總(zong)數，設所(suo)需(xu)要的PCR 反(fan)應(ying)管管數為(wei) N(N=樣本數+1 管陰性(xing)對照(zhao)+1 管陽性(xing)對照(zhao)；反(fan)應(ying)管數每滿10 份(fen)，多配制1 份(fen))，每(mei)測(ce)試(shi)反(fan)應(ying)體系(xi)配制如下(xia)表(biao)：

將(jiang)混(hun)合(he)好(hao)的(de)測(ce)試(shi)反(fan)應(ying)液分裝(zhuang)到(dao) PCR 反(fan)應(ying)管中(zhong)，20μL/管。

3.加(jia)樣（樣本處(chu)理區）將(jiang)步(bu)驟(zhou) 1 提(ti)取(qu)的(de)核酸(suan)、陽性(xing)質控(kong)品(pin)、陰(yin)性(xing)質控(kong)品(pin)各取(qu)5μL，分別加(jia)入相應(ying)的反應(ying)管中(zhong)，蓋好(hao)管蓋，混(hun)勻(yun)，短暫離心。

4.PCR 擴增(zeng)（核酸(suan)擴增(zeng)區）

2.1 將(jiang)待(dai)檢測反應(ying)管置於熒(ying)光(guang)定(ding)量 PCR 儀(yi)反(fan)應(ying)槽內(nei)；

2.2 設(she)置好通(tong)道、樣品(pin)信息(xi)，反(fan)應(ying)體系(xi)設置為(wei) 25μL；熒(ying)光(guang)通(tong)道選擇(ze)：檢測通(tong)道（Reporter Dye）FAM，淬(cui)滅(mie)通(tong)道（Quencher Dye）NONE，ABI 系(xi)列儀(yi)器(qi)請勿選(xuan)擇 ROX 參(can)比(bi)熒(ying)光(guang)，選擇 None 即可。

2.3 推(tui)薦循環參數設置：

5.結(jie)果(guo)分析(xi)判定(ding)

5.1結(jie)果(guo)分析(xi)條(tiao)件(jian)設定(ding)（請(qing)參(can)照(zhao)各儀(yi)器(qi)使用說(shuo)明書(shu)進(jin)行(xing)設(she)置，以分析(xi) ABI7500 儀(yi)器(qi)為(wei)例(li)） 反(fan)應(ying)結束後自(zi)動保(bao)存結果(guo)，根(gen)據(ju)分析(xi)後圖(tu)像(xiang)調節 Baseline 的(de) Start 值、End 值以及 Threshold 值（用戶可(ke)根(gen) 據(ju)實際情(qing)況(kuang)自(zi)行(xing)調整(zheng)，Start 值可(ke)設(she)在(zai) 3～15、End 值可(ke)設(she)在(zai) 5～20，使閾值線位於(yu)擴增(zeng)曲(qu)線指數期，陰性(xing)質控(kong) 品(pin)的(de)擴增(zeng)曲(qu)線平直(zhi)或(huo)低於(yu)閾值線），點(dian)擊 Analyze 自(zi)動(dong)獲得分析(xi)結果(guo)。

5.2結(jie)果(guo)判斷

陽性(xing)：檢測通(tong)道Ct 值≤40，且(qie)曲(qu)線有(you)明顯(xian)的指數增長(chang)曲(qu)線；

陰(yin)性(xing)：樣本檢測結果(guo)無(wu)Ct 值，且(qie)無(wu)特(te)異(yi)性(xing)擴增(zeng)曲(qu)線；

可(ke)疑：樣本檢測結果(guo)40＜Ct 值≤45，建(jian)議(yi)重復(fu)檢測，如果(guo)檢測通(tong)道仍為(wei)40值≤45，且(qie)曲(qu)線有(you)明顯(xian)的增長(chang) 曲(qu)線，判定(ding)為(wei)陽性(xing)，否則(ze)為(wei)陰(yin)性(xing)。

5.3 質(zhi)控(kong)標(biao)準 陰(yin)性(xing)質控(kong)品(pin)：無(wu)特(te)異(yi)性(xing)擴增(zeng)曲(qu)線或(huo)無Ct 值顯(xian)示；陽性(xing)質控(kong)品(pin)：擴增(zeng)曲(qu)線有(you)明顯(xian)指數增長(chang)期，且(qie) Ct 值≤32；以上條(tiao)件(jian)應(ying)同時滿足(zu)，否(fou)則(ze)實驗視為(wei)無(wu)效(xiao)。

3. 檢測方(fang)法的(de)局限性(xing)

1. 樣本檢測結果(guo)與樣本收(shou)集(ji)、處(chu)理、運送(song)以及保存質量(liang)有(you)關(guan)；

2. 樣本提(ti)取(qu)過程中(zhong)沒有(you)控(kong)制好(hao)交叉汙(wu)染(ran)，會(hui)出(chu)現(xian)假(jia)陽性(xing)結果(guo)；

3. 陽性(xing)對照(zhao)、擴增(zeng)產物泄漏(lou)，會(hui)導致假(jia)陽性(xing)結果(guo)；

4. 病原體在(zai)流行(xing)過程中(zhong)基(ji)因(yin)突變(bian)、重組，會導致假(jia)陰性(xing)結果(guo)；

5. 不同的(de)提取(qu)方(fang)法存在(zai)提取(qu)效(xiao)率(lv)差異，會(hui)導致假(jia)陰性(xing)結果(guo)；

6. 試(shi)劑(ji)運(yun)輸(shu)，保(bao)存不當(dang)或(huo)試(shi)劑(ji)配(pei)制不準確(que)引(yin)起(qi)的試(shi)劑(ji)檢測效(xiao)能(neng)下(xia)降(jiang)，出(chu)現(xian)假(jia)陰性(xing)或(huo)定(ding)量檢測不準確(que)的(de)結果；

7. 本(ben)檢測結果(guo)僅(jin)供參考(kao)，如須確(que)診請結(jie)合(he)臨(lin)床(chuang)癥(zheng)狀以及其他(ta)檢測手(shou)段(duan)。

【偽(wei)狂(kuang)犬(quan)病毒野(ye)毒(du)株(PRV-gE)核(he)酸(suan)試(shi)劑(ji)盒(he)(熒(ying)光(guang)-PCR法)註(zhu)意(yi)事項】

1.所(suo)有(you)操作嚴(yan)格按(an)照(zhao)說(shuo)明書(shu)進(jin)行(xing)；

2.試(shi)劑(ji)盒(he)內(nei)各種(zhong)組分使用前應(ying)自然融化，完(wan)quan混(hun)勻(yun)並(bing)短暫離心；

3.反(fan)應(ying)液應(ying)避光保存；

4.反(fan)應(ying)中(zhong)盡量(liang)避免(mian)氣(qi)泡存在(zai)，管蓋需蓋緊(jin)；

5.使用壹(yi)次(ci)性(xing)吸頭(tou)、壹(yi)次(ci)性(xing)手(shou)套(tao)和(he)各區專(zhuan)用工(gong)作服；

6.樣本處(chu)理、試(shi)劑(ji)配(pei)制、加(jia)樣需在(zai)不同區進(jin)行(xing)，以免(mian)交叉汙(wu)染(ran)；

7.實驗完畢(bi)後(hou)用 10%次(ci)氯(lv)酸(suan)或(huo) 75%酒(jiu)精(jing)或(huo)紫外(wai)燈(deng)處(chu)理工(gong)作臺和(he)移液(ye)器(qi)；

8.試(shi)劑(ji)盒(he)裏(li)所(suo)有(you)物(wu)品(pin)應(ying)視為(wei)汙(wu)染(ran)物(wu)對(dui)待(dai)，並按照(zhao)《微生(sheng)物(wu)生物(wu)醫學實驗室生(sheng)物安全通(tong)則(ze)》進(jin)行(xing)處(chu)理。

我(wo)司的實時熒(ying)光(guang)探(tan)針法(fa)試(shi)劑(ji)盒(he)種(zhong)類(lei)齊(qi)全（涵蓋(gai)禽(qin)病、豬(zhu)病、馬(ma)牛(niu)羊(yang)病和(he)水產動(dong)物病原體檢測），精準高效(xiao)，多重檢測（壹(yi)重、雙(shuang)重、三(san)重），現(xian)貨(huo)供應(ying)歡(huan)迎(ying)廣(guang)大新(xin)老(lao)客戶前來(lai)選購。