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PCR試(shi)劑(ji)盒
禽類(lei)PCR試(shi)劑(ji)盒
50T禽肺(fei)病毒(du)(APV)PCR檢測試(shi)劑(ji)盒
產品簡介(jie)
禽肺(fei)病毒(du)(APV)PCR檢測試(shi)劑(ji)盒是我司實時(shi)熒(ying)光探針(zhen)法試(shi)劑(ji)盒,種(zhong)類齊(qi)全,精(jing)準高(gao)效,現(xian)貨供(gong)應(ying),歡迎廣(guang)大(da)新老(lao)客戶前(qian)來(lai)選(xuan)購。
產品分類(lei)
【產品名(ming)稱(cheng)】
商(shang)品名(ming)稱(cheng):禽肺(fei)病毒(du)(APV)PCR檢測試(shi)劑(ji)盒
【包裝(zhuang)規(gui)格】25T/盒、50T/盒
我司的(de)實時(shi)熒(ying)光探針(zhen)法試(shi)劑(ji)盒種(zhong)類齊(qi)全(涵(han)蓋禽病(bing)、豬病(bing)、馬牛羊病(bing)和(he)水產動物病(bing)原體檢測),精準高(gao)效,多重(zhong)檢測(壹(yi)重、雙重、三(san)重(zhong)),現(xian)貨供(gong)應(ying)歡迎廣(guang)大(da)新老(lao)客戶前(qian)來(lai)選(xuan)購。
【檢驗(yan)原理】本(ben)試(shi)劑(ji)盒采用TaqMan 探針(zhen)法實時(shi)熒(ying)光PCR 技術(shu),根據禽肺(fei)病毒(du)(APV)核(he)酸(suan)基因設(she)計(ji)特(te)異性(xing)引物和(he)熒(ying)光探針(zhen),用熒(ying)光PCR技術(shu)對禽肺(fei)病毒(du)(APV)的(de)核(he)酸(suan)進行(xing)體外擴(kuo)增檢(jian)測,用於臨(lin)床(chuang)上(shang)對可(ke)疑感染病料的(de)病原學(xue)診斷(duan)。
【試(shi)劑(ji)組成(cheng)】
包裝(zhuang)規(gui)格 | 25T/盒 | 50T/盒 |
PCR反(fan)應液 | 500 μL×1管 | 1000 μL×1管 |
陽性(xing)對照(zhao) | 40 μL×1管 | 40 μL×1管 |
陰性(xing)對照(zhao) | 40 μL×1管 | 40 μL×1管 |
說明書 | 1份 | 1份 |
說明:不(bu)同(tong)批(pi)號的(de)試(shi)劑(ji)盒組分不(bu)可交互(hu)使(shi)用
【儲存條件及(ji)有(you)效期(qi)】
避(bi)光-20℃以下保存,避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍融(rong),有(you)效期(qi)12個月。
【適用儀器】 ABI 系列、Bio-Rad系(xi)列、Agilent Stratagene MX系(xi)列、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系(xi)列、杭(hang)州(zhou)博(bo)日(ri)系(xi)列等(deng)多通道(dao)實(shi)時(shi)熒(ying)光定量PCR儀。
【禽肺(fei)病毒(du)(APV)PCR檢測試(shi)劑(ji)盒產品展(zhan)示(shi)】

【檢驗(yan)方法】
1. 試(shi)劑(ji)準備(試(shi)劑(ji)準備區(qu))
(1)從冰箱中取(qu)出(chu)試(shi)劑(ji)盒, 從試(shi)劑(ji)盒中取(qu)出(chu)實驗(yan)所(suo)需試(shi)劑(ji),充分(fen)融(rong)化(hua)混勻並瞬時(shi)離(li)心以去除(chu)管壁(bi)附著(zhe)液體。
(2)核(he)算(suan)當(dang)次(ci)實驗(yan)所(suo)需要(yao)的(de)反(fan)應數(n),並根據如下表(biao)所(suo)示反(fan)應體系計算(suan)當(dang)次(ci)實驗(yan)所(suo)需要(yao)的(de)各種(zhong)試(shi)劑(ji)量。
n =陰性(xing)對照(zhao)數(1T)+陽性(xing)對照(zhao)數(1T)+誤(wu)差(cha)預(yu)留量(1T)+樣(yang)本(ben)數
單反(fan)液配制(zhi)表(biao)(每份) | PCR反(fan)應液(UNG酶及Taq酶) | 20 μL |
(3)在無(wu)菌離(li)心管中加(jia)入上(shang)述(shu)試(shi)劑(ji),充分(fen)混勻後瞬時(shi)離(li)心。按照(zhao)20μL/管分裝量將試(shi)劑(ji)分裝至PCR反(fan)應管。
(4)蓋緊(jin)PCR反(fan)應管蓋後將(jiang)PCR反(fan)應管轉(zhuan)移至(zhi)樣(yang)本(ben)處理區(qu)。剩(sheng)余試(shi)劑(ji)放(fang)回-20℃以(yi)下冰箱冷凍保存(cun)。
2.樣(yang)本(ben)準備(樣(yang)本(ben)處理區(qu))
用DNA/RNA提(ti)取(qu)試(shi)劑(ji)盒提(ti)取(qu)核(he)酸(suan)即可,具體操作按照(zhao)其(qi)試(shi)劑(ji)盒說明書
3.加樣(yang)
在上(shang)述(shu)制(zhi)備好(hao)的(de)PCR反(fan)應樣(yang)本(ben)管中分(fen)別加入處(chu)理好(hao)的(de)待測標本(ben)DNA各5 μl、終(zhong)體積(ji)25 μl/管,蓋好(hao)PCR反(fan)應蓋(gai)混勻後瞬時(shi)低(di)速離心,轉(zhuan)移到PCR儀器上(shang)。陰性(xing)對照(zhao)和(he)陽性(xing)對照(zhao)管則各加(jia)5 μL試(shi)劑(ji)盒自帶的(de)陰性(xing)對照(zhao)或(huo)陽性(xing)對照(zhao)品,終體積(ji)為(wei)25 μl/管,蓋好(hao)PCR反(fan)應蓋(gai)混勻後瞬時(shi)低(di)速離心,轉(zhuan)移到PCR儀器上(shang)。
4.PCR(PCR擴(kuo)增區(qu))
(1)取樣(yang)本(ben)處理區(qu)準(zhun)備好(hao)的(de)PCR反(fan)應管,放(fang)置在實(shi)時(shi)熒(ying)光定量PCR儀樣(yang)品槽(cao)相應位(wei)置(zhi),並記(ji)錄放(fang)置順(shun)序(xu)。
(2)按下表(biao)設(she)置(zhi)儀器核(he)酸(suan)擴(kuo)增相關(guan)參數進行(xing)PCR擴(kuo)增。
反(fan)應體積(ji) | 25 μL | 通道(dao)選(xuan)擇(ze) | FAM通道(dao)采(cai)集(ji)禽肺(fei)病毒(du)(APV)核(he)酸(suan)熒(ying)光信號(hao) |
PCR 反(fan)應 條件 | 步驟(zhou) | 條件 | 循(xun)環數 |
UNG處理 | 37℃:2分鐘(min) | 1 | |
預(yu)變性(xing) | 95℃:3分鐘(min) | 1 | |
PCR擴(kuo)增 | 95℃:5秒(s) | 40 | |
55℃:40秒(s) (此階段結(jie)束時(shi)采(cai)集熒(ying)光信號(hao)) |
註(zhu):ABI系列熒(ying)光PCR儀在設(she)置(zhi)時(shi)不(bu)選(xuan)ROX校(xiao)正,設(she)置(zhi)淬(cui)滅(mie)基團(tuan)選(xuan)擇(ze)None。
【註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)】
1.使(shi)用本(ben)試(shi)劑(ji)盒的(de)實驗(yan)室(shi),應嚴格按照(zhao)國家(jia)有(you)關(guan)部(bu)分頒(ban)布的(de)有(you)關(guan)基因擴(kuo)增檢(jian)驗(yan)實(shi)驗(yan)室(shi)管理規(gui)範進行(xing)管理;
2.為避(bi)免(mian)RNA降解,樣(yang)本(ben)處理過(guo)程(cheng)應(ying)在0-4℃條件下操作,且(qie)完成(cheng)實驗(yan)後立(li)即(ji)上(shang)機檢(jian)測;樣(yang)本(ben)處理過(guo)程(cheng)中使(shi)用的(de)器具耗(hao)材(cai)應(ying)經過(guo)無(wu)核(he)酶(mei)處(chu)理;
3.各區域物品均為專(zhuan)用,不(bu)得(de)交叉(cha)使(shi)用,以免(mian)汙(wu)染;檢測結(jie)束後,應(ying)立(li)即對工(gong)作(zuo)臺清潔;
4.吸(xi)取(qu)反(fan)應液時(shi),應(ying)盡量避(bi)免(mian)產生氣(qi)泡(pao);上(shang) PCR 儀前(qian),應註(zhu)意(yi)檢(jian)查各(ge)反(fan)應管是否蓋(gai)緊(jin),以免(mian)液體蒸發造(zao)成(cheng)結(jie)果不(bu)準確(que);
5.試(shi)劑(ji)盒所(suo)有(you)試(shi)劑(ji)在使(shi)用前(qian)應該在常(chang)溫下充分(fen)融(rong)化(hua)混勻,並應瞬時(shi)離(li)心;
6.試(shi)劑(ji)盒內所(suo)配陰性(xing)和(he)陽性(xing)對照(zhao)在第(di)壹(yi)次(ci)使(shi)用前(qian)應全(quan)部(bu)轉(zhuan)移至(zhi)標(biao)本(ben)準備區(qu),並單獨存放(fang);
7.為防(fang)止熒(ying)光幹(gan)擾(rao),應避(bi)免(mian)裸手(shou)直接接觸PCR反(fan)應管,並應避(bi)免(mian)在PCR反(fan)應管上(shang)進行(xing)任何標記(ji);
8.檢測過(guo)程(cheng)中使(shi)用過(guo)的(de)吸(xi)頭,應直接打到盛(sheng)有(you) 10%次(ci)氯酸(suan)的(de)廢(fei)物缸(gang)內(nei),檢測結(jie)束的(de)PCR 反(fan)應管,切忌(ji)開蓋(gai),並與其(qi)他(ta)廢(fei)棄(qi)物品壹(yi)同(tong)滅(mie)菌後丟(diu)棄(qi);工(gong)作(zuo)臺及各(ge)種(zhong)實驗(yan)用品應定(ding)期(qi)用 10%次(ci)氯酸(suan)、75%酒(jiu)精或(huo)紫外燈進行(xing)消毒(du);
9.儀器擴(kuo)增相關(guan)參數應按(an)照(zhao)本(ben)說明書相關(guan)要(yao)求(qiu)進行(xing)設(she)置(zhi);不(bu)同(tong)批(pi)號試(shi)劑(ji)不(bu)能(neng)混用;並在有(you)效期(qi)內(nei)使(shi)用.
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