產(chan)品(pin)中(zhong)心
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產品中(zhong)心(xin)
PCR試(shi)劑盒(he)
禽(qin)類PCR試(shi)劑盒(he)
50T禽(qin)流(liu)感(gan)病(bing)毒H5亞型核酸檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)熒(ying)光(guang)PCR法(fa)
產(chan)品簡介
禽(qin)流(liu)感(gan)病(bing)毒H5亞型核酸檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)熒(ying)光(guang)PCR法(fa)是我(wo)司實時熒(ying)光(guang)探針(zhen)法(fa)試(shi)劑盒(he),種類(lei)齊(qi)全,精(jing)準高效,現(xian)貨供應,歡(huan)迎(ying)廣大新老(lao)客(ke)戶前來(lai)選(xuan)購。
產(chan)品(pin)分類
【產(chan)品名(ming)稱】
商(shang)品(pin)名(ming)稱:禽(qin)流(liu)感(gan)病(bing)毒H5亞型核酸檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)熒(ying)光(guang)PCR法(fa)
【包(bao)裝規(gui)格】25T/盒(he)、50T/盒(he)
我(wo)司的(de)實時熒(ying)光(guang)探針(zhen)法(fa)試(shi)劑盒(he)種類(lei)齊(qi)全(涵蓋禽(qin)病(bing)、豬病(bing)、馬(ma)牛羊病(bing)和(he)水(shui)產動(dong)物病(bing)原(yuan)體(ti)檢(jian)測(ce)),精準(zhun)高效,多重檢(jian)測(ce)(壹(yi)重、雙重、三重),現貨供應歡(huan)迎(ying)廣大新老(lao)客(ke)戶前來(lai)選(xuan)購。
【檢(jian)驗(yan)原(yuan)理】本(ben)試劑(ji)盒(he)采用(yong)TaqMan 探(tan)針法(fa)實(shi)時熒(ying)光(guang)PCR 技(ji)術,根(gen)據禽(qin)流(liu)感(gan)病(bing)毒H5亞型基(ji)因設(she)計(ji)特異(yi)性(xing)引(yin)物和(he)熒(ying)光(guang)探針(zhen),用(yong)熒(ying)光(guang)PCR技(ji)術對禽(qin)流(liu)感(gan)病(bing)毒H5亞型的(de)核酸(suan)進行體(ti)外(wai)擴增檢(jian)測(ce),用(yong)於(yu)臨床上對(dui)可(ke)疑(yi)感(gan)染(ran)病(bing)料(liao)的(de)病(bing)原(yuan)學診(zhen)斷。
【試(shi)劑組成】
包(bao)裝規(gui)格 | 25T/盒(he) | 50T/盒(he) |
PCR反(fan)應液 | 500 μL×1管(guan) | 1000 μL×1管(guan) |
陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao) | 40 μL×1管(guan) | 40 μL×1管(guan) |
陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao) | 40 μL×1管(guan) | 40 μL×1管(guan) |
說(shuo)明書(shu) | 1份(fen) | 1份(fen) |
說(shuo)明:不(bu)同批號(hao)的(de)試劑(ji)盒(he)組分不(bu)可(ke)交(jiao)互(hu)使用(yong)
【儲(chu)存(cun)條(tiao)件及有效期(qi)】
避(bi)光(guang)-20℃以下(xia)保(bao)存,避(bi)免反(fan)復凍融,有效期(qi)12個月(yue)。
【適(shi)用(yong)儀器】 ABI 系(xi)列(lie)、Bio-Rad系(xi)列(lie)、Agilent Stratagene MX系(xi)列(lie)、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系(xi)列(lie)、杭(hang)州(zhou)博日系(xi)列(lie)等(deng)多通(tong)道(dao)實(shi)時熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR儀。
【禽(qin)流(liu)感(gan)病(bing)毒H5亞型核酸檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)熒(ying)光(guang)PCR法(fa)產(chan)品展(zhan)示】

【檢(jian)驗(yan)方法(fa)】
1. 試(shi)劑準備(試(shi)劑(ji)準(zhun)備區(qu))
(1)從(cong)冰箱中(zhong)取(qu)出試劑盒(he), 從試(shi)劑盒(he)中取(qu)出實驗所需試(shi)劑(ji),充分融化混勻(yun)並瞬(shun)時離心以(yi)去除管(guan)壁(bi)附著液體(ti)。
(2)核(he)算當次(ci)實驗所需要(yao)的(de)反(fan)應數(shu)(n),並根(gen)據如(ru)下(xia)表所示反(fan)應體(ti)系(xi)計(ji)算當次(ci)實驗所需要(yao)的(de)各種試(shi)劑量(liang)。
n =陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)數(1T)+陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)數(1T)+誤(wu)差(cha)預留量(liang)(1T)+樣本(ben)數
單反(fan)液配(pei)制表(每份(fen)) | PCR反(fan)應液(UNG酶(mei)及Taq酶(mei)) | 20 μL |
(3)在(zai)無菌(jun)離心管(guan)中加(jia)入上述(shu)試(shi)劑(ji),充分混勻(yun)後(hou)瞬時離心。按照(zhao)20μL/管分裝量(liang)將試劑分裝至PCR反(fan)應管(guan)。
(4)蓋緊(jin)PCR反(fan)應管(guan)蓋後(hou)將PCR反(fan)應管(guan)轉(zhuan)移(yi)至(zhi)樣本(ben)處(chu)理區(qu)。剩余試(shi)劑(ji)放回-20℃以(yi)下(xia)冰箱冷凍(dong)保(bao)存。
2.樣本(ben)準備(bei)(樣本(ben)處(chu)理區(qu))
用(yong)DNA/RNA提(ti)取(qu)試(shi)劑盒(he)提(ti)取(qu)核(he)酸即(ji)可(ke),具(ju)體(ti)操作按照(zhao)其試(shi)劑(ji)盒(he)說明書(shu)
3.加(jia)樣
在(zai)上述(shu)制備好(hao)的(de)PCR反(fan)應樣本(ben)管中(zhong)分別加(jia)入處(chu)理好的(de)待測(ce)標本(ben)DNA各5 μl、終體(ti)積(ji)25 μl/管,蓋好(hao)PCR反(fan)應蓋混(hun)勻(yun)後(hou)瞬時低(di)速離心,轉移(yi)到PCR儀器上。陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)和(he)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)管則各加(jia)5 μL試(shi)劑(ji)盒(he)自(zi)帶(dai)的(de)陰性(xing)對(dui)照(zhao)或陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)品,終體(ti)積(ji)為25 μl/管,蓋好(hao)PCR反(fan)應蓋混(hun)勻(yun)後(hou)瞬時低(di)速離心,轉移(yi)到PCR儀器上。
4.PCR(PCR擴增區(qu))
(1)取(qu)樣本(ben)處(chu)理區(qu)準備(bei)好的(de)PCR反(fan)應管(guan),放置在(zai)實時熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR儀樣品槽(cao)相應位(wei)置(zhi),並記錄(lu)放置順(shun)序。
(2)按下(xia)表設(she)置儀器核酸(suan)擴增相(xiang)關(guan)參數(shu)進行PCR擴增。
反(fan)應體(ti)積(ji) | 25 μL | 通(tong)道(dao)選(xuan)擇(ze) | FAM通(tong)道(dao)采(cai)集禽(qin)流(liu)感(gan)病(bing)毒H5亞型熒(ying)光(guang)信號(hao) |
PCR 反(fan)應 條(tiao)件 | 步驟(zhou) | 條(tiao)件 | 循環(huan)數 |
UNG處(chu)理 | 37℃:2分鐘(min) | 1 | |
預變性(xing) | 95℃:3分鐘(min) | 1 | |
PCR擴增 | 95℃:5秒(miao)(s) | 40 | |
55℃:40秒(miao)(s) (此(ci)階(jie)段(duan)結束(shu)時采集熒(ying)光(guang)信號(hao)) |
註(zhu):ABI系(xi)列(lie)熒(ying)光(guang)PCR儀在設(she)置時不(bu)選(xuan)ROX校(xiao)正,設(she)置淬滅基(ji)團選(xuan)擇(ze)None。
【註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)】
1.使用(yong)本(ben)試劑(ji)盒(he)的(de)實驗(yan)室(shi),應嚴(yan)格(ge)按照(zhao)國家有關(guan)部(bu)分頒(ban)布(bu)的(de)有關(guan)基(ji)因擴增檢(jian)驗(yan)實驗(yan)室管理規(gui)範進行管理;
2.為(wei)避(bi)免RNA降(jiang)解(jie),樣本(ben)處(chu)理過程(cheng)應在(zai)0-4℃條(tiao)件下(xia)操作,且完成(cheng)實(shi)驗後(hou)立即(ji)上機檢(jian)測(ce);樣本(ben)處(chu)理過程(cheng)中使用(yong)的(de)器具(ju)耗材(cai)應經過無核酶(mei)處(chu)理;
3.各區(qu)域(yu)物品(pin)均(jun)為(wei)專(zhuan)用(yong),不(bu)得(de)交(jiao)叉使用(yong),以(yi)免汙染;檢(jian)測(ce)結束(shu)後(hou),應立即(ji)對(dui)工(gong)作臺清潔(jie);
4.吸取反(fan)應液時,應盡(jin)量(liang)避(bi)免產生(sheng)氣泡;上 PCR 儀前,應註(zhu)意(yi)檢(jian)查各反(fan)應管(guan)是否(fou)蓋緊(jin),以(yi)免液體(ti)蒸發(fa)造(zao)成結果不(bu)準(zhun)確;
5.試(shi)劑盒(he)所有試(shi)劑(ji)在使用(yong)前(qian)應該(gai)在(zai)常溫(wen)下(xia)充(chong)分融化混勻(yun),並應瞬(shun)時離心;
6.試(shi)劑盒(he)內所(suo)配陰性(xing)和(he)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)在第(di)壹(yi)次使用(yong)前(qian)應全(quan)部(bu)轉(zhuan)移(yi)至(zhi)標本(ben)準備(bei)區(qu),並單獨存放;
7.為(wei)防止熒(ying)光(guang)幹擾,應避(bi)免裸手(shou)直接(jie)接(jie)觸PCR反(fan)應管(guan),並應避(bi)免在PCR反(fan)應管(guan)上進行任何(he)標記;
8.檢(jian)測(ce)過程(cheng)中使用(yong)過(guo)的(de)吸頭,應直接(jie)打到盛(sheng)有 10%次(ci)氯酸(suan)的(de)廢物缸內,檢(jian)測(ce)結束(shu)的(de)PCR 反(fan)應管(guan),切忌(ji)開蓋,並與(yu)其(qi)他廢棄(qi)物品(pin)壹(yi)同滅菌(jun)後(hou)丟棄;工(gong)作臺及各種實(shi)驗用(yong)品(pin)應定(ding)期(qi)用(yong) 10%次(ci)氯酸(suan)、75%酒(jiu)精或紫(zi)外(wai)燈(deng)進行消毒;
9.儀器擴增相(xiang)關(guan)參數(shu)應按照(zhao)本(ben)說明書(shu)相關(guan)要(yao)求(qiu)進行設(she)置;不(bu)同批號(hao)試(shi)劑(ji)不(bu)能(neng)混用(yong);並在(zai)有效期(qi)內使用(yong).
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