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PCR試(shi)劑盒(he)
禽類PCR試(shi)劑盒(he)
50T禽流感(gan)病毒H9亞(ya)型(xing)核酸檢測(ce)試劑盒(he)熒(ying)光(guang)PCR法(fa)
產品簡(jian)介
禽流感(gan)病毒H9亞(ya)型(xing)核酸檢測(ce)試劑盒(he)熒(ying)光(guang)PCR法(fa)是(shi)我司(si)實(shi)時熒光探針法試(shi)劑盒(he),種(zhong)類(lei)齊(qi)全,精準高效,現貨(huo)供(gong)應,歡(huan)迎廣大新(xin)老(lao)客戶前(qian)來(lai)選購。
產品分類(lei)
【產品名(ming)稱】
商品名(ming)稱:禽流感(gan)病毒H9亞型核酸檢測(ce)試劑盒(he)熒(ying)光(guang)PCR法(fa)
【包(bao)裝規(gui)格(ge)】25T/盒、50T/盒
我司(si)的(de)實(shi)時熒光探針法試(shi)劑盒(he)種(zhong)類(lei)齊(qi)全(涵蓋(gai)禽病、豬(zhu)病、馬牛(niu)羊病(bing)和(he)水產(chan)動物病(bing)原體檢測(ce)),精準高效,多重檢測(ce)(壹重、雙重、三重),現貨(huo)供(gong)應歡(huan)迎廣大新(xin)老(lao)客戶前(qian)來(lai)選購。
【檢驗(yan)原理(li)】本試劑盒(he)采(cai)用(yong)TaqMan 探針法實(shi)時熒光PCR 技術,根據禽流感(gan)病毒H9亞型基因(yin)設(she)計特(te)異(yi)性(xing)引(yin)物(wu)和(he)熒光(guang)探(tan)針,用(yong)熒(ying)光(guang)PCR技術對禽流感(gan)病毒H9亞型的核酸進(jin)行體外(wai)擴增(zeng)檢測(ce),用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)上對可(ke)疑感(gan)染(ran)病料的病原學診斷。
【試劑組(zu)成(cheng)】
包(bao)裝規(gui)格(ge) | 25T/盒 | 50T/盒 |
PCR反應液 | 500 μL×1管 | 1000 μL×1管 |
陽性對(dui)照 | 40 μL×1管 | 40 μL×1管 |
陰性對(dui)照(zhao) | 40 μL×1管 | 40 μL×1管 |
說明書(shu) | 1份(fen) | 1份(fen) |
說明:不(bu)同批號(hao)的(de)試(shi)劑盒(he)組(zu)分不(bu)可(ke)交互(hu)使(shi)用(yong)
【儲存條(tiao)件及有效期(qi)】
避光-20℃以(yi)下(xia)保(bao)存(cun),避免反復凍(dong)融(rong),有效期(qi)12個(ge)月(yue)。
【適用(yong)儀器(qi)】 ABI 系列、Bio-Rad系(xi)列、Agilent Stratagene MX系(xi)列、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系(xi)列、杭(hang)州博日(ri)系(xi)列(lie)等(deng)多(duo)通道(dao)實(shi)時熒光定量(liang)PCR儀。
【禽流感(gan)病毒H9亞型核酸檢測(ce)試劑盒(he)熒(ying)光(guang)PCR法產品展示】

【檢驗(yan)方(fang)法(fa)】
1. 試劑準備(試(shi)劑準備區(qu))
(1)從冰箱中取(qu)出試劑盒(he), 從(cong)試(shi)劑盒(he)中取(qu)出實(shi)驗(yan)所需試劑,充(chong)分融(rong)化(hua)混勻(yun)並(bing)瞬時(shi)離(li)心以(yi)去(qu)除(chu)管壁附(fu)著液(ye)體。
(2)核算(suan)當次(ci)實(shi)驗(yan)所需要的反應數(n),並(bing)根據如下(xia)表(biao)所示反應體系計算(suan)當次(ci)實(shi)驗(yan)所需要的各種(zhong)試(shi)劑量(liang)。
n =陰性對(dui)照(zhao)數(1T)+陽性對(dui)照數(shu)(1T)+誤(wu)差(cha)預留(liu)量(liang)(1T)+樣(yang)本(ben)數(shu)
單反液配(pei)制(zhi)表(biao)(每份(fen)) | PCR反應液(UNG酶及Taq酶) | 20 μL |
(3)在無(wu)菌離(li)心管中加(jia)入(ru)上述試(shi)劑,充(chong)分混勻(yun)後(hou)瞬(shun)時(shi)離(li)心。按照20μL/管分裝量(liang)將(jiang)試(shi)劑分裝至(zhi)PCR反應管。
(4)蓋(gai)緊(jin)PCR反應管蓋(gai)後(hou)將(jiang)PCR反(fan)應管轉(zhuan)移至(zhi)樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)區(qu)。剩(sheng)余(yu)試劑放回(hui)-20℃以(yi)下(xia)冰箱冷(leng)凍(dong)保(bao)存(cun)。
2.樣(yang)本(ben)準備(樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)區(qu))
用(yong)DNA/RNA提(ti)取(qu)試劑盒(he)提(ti)取(qu)核酸即(ji)可(ke),具體操作按照其(qi)試劑盒(he)說(shuo)明書(shu)
3.加(jia)樣(yang)
在上(shang)述制(zhi)備(bei)好的PCR反應樣(yang)本(ben)管中分別(bie)加(jia)入(ru)處理(li)好的待測(ce)標(biao)本(ben)DNA各5 μl、終(zhong)體積25 μl/管,蓋(gai)好PCR反應蓋(gai)混勻(yun)後(hou)瞬(shun)時(shi)低(di)速離(li)心,轉(zhuan)移到(dao)PCR儀器(qi)上(shang)。陰性對(dui)照(zhao)和(he)陽性(xing)對(dui)照(zhao)管則各加(jia)5 μL試劑盒(he)自(zi)帶(dai)的陰性對(dui)照(zhao)或陽(yang)性對照(zhao)品,終(zhong)體積為25 μl/管,蓋(gai)好PCR反應蓋(gai)混勻(yun)後(hou)瞬(shun)時(shi)低(di)速離(li)心,轉(zhuan)移到(dao)PCR儀器(qi)上(shang)。
4.PCR(PCR擴增(zeng)區(qu))
(1)取(qu)樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)區(qu)準備好的PCR反應管,放置(zhi)在實(shi)時熒光定量(liang)PCR儀樣(yang)品槽(cao)相(xiang)應位置(zhi),並(bing)記錄放置(zhi)順序(xu)。
(2)按下(xia)表(biao)設(she)置(zhi)儀器(qi)核酸擴增(zeng)相(xiang)關參數進(jin)行PCR擴增(zeng)。
反應體積 | 25 μL | 通道(dao)選擇(ze) | FAM通道(dao)采集禽流感(gan)病毒H9亞型熒光信(xin)號(hao) |
PCR 反應 條件 | 步驟 | 條件 | 循(xun)環數 |
UNG處理(li) | 37℃:2分鐘(zhong)(min) | 1 | |
預變性(xing) | 95℃:3分鐘(zhong)(min) | 1 | |
PCR擴增(zeng) | 95℃:5秒(s) | 40 | |
55℃:40秒(s) (此階段結(jie)束時(shi)采集(ji)熒(ying)光(guang)信(xin)號(hao)) |
註:ABI系列熒(ying)光PCR儀在設(she)置(zhi)時不選(xuan)ROX校正,設置(zhi)淬滅基團(tuan)選(xuan)擇(ze)None。
【註意事(shi)項(xiang)】
1.使(shi)用(yong)本(ben)試(shi)劑盒(he)的(de)實(shi)驗(yan)室(shi),應嚴格(ge)按照國(guo)家(jia)有關部分頒(ban)布的有關基因(yin)擴增(zeng)檢驗(yan)實(shi)驗(yan)室(shi)管理(li)規範(fan)進(jin)行管理(li);
2.為避免RNA降(jiang)解,樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)過程(cheng)應在0-4℃條(tiao)件下(xia)操作,且(qie)完(wan)成(cheng)實(shi)驗(yan)後(hou)立(li)即(ji)上(shang)機檢測(ce);樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)過程(cheng)中使(shi)用(yong)的(de)器(qi)具耗材(cai)應經過(guo)無(wu)核酶處(chu)理(li);
3.各區(qu)域(yu)物(wu)品均(jun)為專(zhuan)用(yong),不(bu)得(de)交叉(cha)使(shi)用(yong),以(yi)免汙(wu)染(ran);檢測(ce)結(jie)束後(hou),應立(li)即(ji)對(dui)工(gong)作臺清潔;
4.吸取(qu)反應液時(shi),應盡量(liang)避(bi)免產生(sheng)氣(qi)泡(pao);上(shang) PCR 儀前(qian),應註意檢查(zha)各反(fan)應管是(shi)否(fou)蓋(gai)緊(jin),以(yi)免液體蒸(zheng)發造(zao)成(cheng)結(jie)果不(bu)準確(que);
5.試劑盒(he)所有試劑在使(shi)用(yong)前(qian)應該在常溫(wen)下(xia)充(chong)分融(rong)化(hua)混勻(yun),並(bing)應瞬時(shi)離(li)心;
6.試劑盒(he)內(nei)所配(pei)陰性和(he)陽性(xing)對(dui)照(zhao)在第(di)壹次(ci)使(shi)用(yong)前(qian)應全部(bu)轉(zhuan)移至(zhi)標(biao)本(ben)準備區(qu),並(bing)單獨存放;
7.為防(fang)止(zhi)熒光(guang)幹擾,應避免裸手(shou)直(zhi)接(jie)接(jie)觸PCR反應管,並(bing)應避免在PCR反(fan)應管上進行任(ren)何(he)標(biao)記;
8.檢測(ce)過程(cheng)中使(shi)用(yong)過(guo)的(de)吸頭(tou),應直(zhi)接(jie)打到(dao)盛(sheng)有 10%次(ci)氯(lv)酸的(de)廢(fei)物缸(gang)內(nei),檢測(ce)結(jie)束的(de)PCR 反應管,切(qie)忌開(kai)蓋(gai),並(bing)與其他(ta)廢棄(qi)物品壹(yi)同(tong)滅菌(jun)後(hou)丟(diu)棄(qi);工作臺及各種(zhong)實(shi)驗(yan)用(yong)品應定期(qi)用(yong) 10%次(ci)氯(lv)酸、75%酒精或(huo)紫(zi)外(wai)燈(deng)進行消(xiao)毒;
9.儀器(qi)擴增(zeng)相(xiang)關參數應按照本(ben)說明書(shu)相(xiang)關要求進行設(she)置(zhi);不同批號(hao)試(shi)劑不(bu)能(neng)混用(yong);並(bing)在有效期(qi)內使(shi)用(yong).
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