人(ren)抗腎小管(guan)基底(di)膜抗體(ti)(TBM）ELISA試(shi)劑盒(he)簡(jian)介(jie)

人抗腎小管(guan)基底(di)膜抗體(ti)(TBM）ELISA試(shi)劑盒(he)簡(jian)介(jie)

備註：

1、標(biao)準品(pin)濃度(du)依次(ci)為：詳見說(shuo)明書(shu)；

2、經過大(da)量正常標(biao)本檢驗(yan)，標(biao)本的正常濃度(du)值均在(zai)試(shi)劑盒(he)提(ti)供的檢(jian)測(ce)範圍內(nei)，實驗(yan)過程(cheng)中(zhong)直(zhi)接(jie)取50μL樣本上樣即(ji)可。當(dang)有(you)部分(fen)樣本值超過最(zui)大(da)標(biao)準品(pin)濃度(du)時，可(ke)用樣本稀釋液(ye)將標(biao)本進行適當稀釋後再(zai)進行(xing)實(shi)驗(yan)。

註意事項(xiang)

1、嚴(yan)格按照規(gui)定(ding)的時間(jian)和溫度(du)進行(xing)溫育(yu)以(yi)保(bao)證準確結果(guo)。所有(you)試(shi)劑都必(bi)須在(zai)使(shi)用前達到室溫20-25℃。使(shi)用後立(li)即(ji)冷藏保(bao)存試(shi)劑。

2、洗板(ban)不正確(que)可(ke)以(yi)導致(zhi)不準確(que)的(de)結果(guo)。在(zai)加入(ru)底(di)物前確保(bao)盡量吸(xi)幹孔(kong)內(nei)液(ye)體(ti)。溫育(yu)過程(cheng)中(zhong)不要讓(rang)微(wei)孔幹燥(zao)掉(diao)。

3、消除(chu)板底(di)殘留的液(ye)體(ti)和手指(zhi)印，否則影(ying)響(xiang)OD值。

4、底(di)物顯色液(ye)應(ying)呈(cheng)無(wu)色或(huo)很(hen)淺(qian)的顏(yan)色，已(yi)經(jing)變藍(lan)的底(di)物液(ye)不能使(shi)用。

5、避(bi)免(mian)試(shi)劑和標(biao)本的交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)以(yi)免(mian)造成(cheng)錯誤(wu)結(jie)果(guo)。

6、在(zai)儲(chu)存和溫育(yu)時避(bi)免(mian)強光(guang)直(zhi)接照射(she)。

7、平衡(heng)至室溫後再(zai)打開(kai)密封袋(dai)以(yi)防水滴凝聚在(zai)冷板(ban)條上。

8、任(ren)何(he)反應試(shi)劑不能接(jie)觸(chu)漂(piao)白(bai)溶劑或(huo)漂(piao)白(bai)溶劑所散發的(de)強烈氣(qi)體(ti)。任(ren)何(he)漂(piao)白(bai)成(cheng)分(fen)都會(hui)破(po)壞(huai)試(shi)劑盒(he)中反應(ying)試(shi)劑的生(sheng)物活性。

9、不能使(shi)用過期(qi)產(chan)品(pin)。

10、如果(guo)可(ke)能(neng)傳(chuan)播疾(ji)病，所有(you)的樣品(pin)都(dou)應管理好(hao)，按照規(gui)定(ding)的程(cheng)序(xu)處(chu)理(li)樣品(pin)和檢測(ce)裝置。

試(shi)劑準備

試(shi)劑盒(he)從(cong)冷藏環(huan)境(jing)中(zhong)取(qu)出(chu)應在(zai)室溫平衡(heng)後方(fang)可(ke)使(shi)用。

20×洗滌(di)緩(huan)沖(chong)液(ye)的(de)稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即(ji)1份(fen)20×洗滌(di)緩(huan)沖(chong)液(ye)加(jia)19份(fen)蒸餾水。

操作(zuo)步(bu)驟

1.從(cong)室溫平衡(heng)20min後的(de)鋁(lv)箔袋(dai)中(zhong)取出所需板條，剩(sheng)余板條用自封袋(dai)密(mi)封放回(hui)4℃。

2. 設(she)置標(biao)準品(pin)孔(kong)和樣本孔，標(biao)準品(pin)孔(kong)各加(jia)不同濃度(du)的標(biao)準品(pin)50μL；

3.樣本孔中加入(ru)待測(ce)樣本50μL；空(kong)白孔不加。

4. 除(chu)空(kong)白孔外(wai)，標(biao)準品(pin)孔(kong)和樣本孔中每孔加入(ru)辣(la)根(gen)過氧(yang)化(hua)物酶(mei)（HRP）標(biao)記的(de)檢(jian)測(ce)抗體(ti)100μL，用封板膜封住反(fan)應(ying)孔，37℃水浴(yu)鍋(guo)或(huo)恒(heng)溫(wen)箱溫育(yu)60min。

5. 棄(qi)去(qu)液(ye)體(ti)，吸(xi)水紙(zhi)上(shang)拍幹，每(mei)孔加(jia)滿洗滌(di)液(ye)（350μL），靜置1min，甩(shuai)去(qu)洗滌(di)液(ye)，吸(xi)水紙(zhi)上(shang)拍幹，如此(ci)重復(fu)洗板(ban)5次（也(ye)可(ke)用洗板機(ji)洗(xi)板(ban)）。

6.每孔(kong)加(jia)入(ru)底(di)物A、B各50μL，37℃避(bi)光(guang)孵(fu)育(yu)15min。

7.每孔(kong)加(jia)入(ru)終止液(ye)50μL，15min內(nei)，在(zai)450nm波長處測(ce)定(ding)各孔(kong)的(de)OD值。

實驗(yan)結果(guo)計算(suan)

以(yi)所測(ce)標(biao)準品(pin)的(de)OD值為橫(heng)坐標(biao)，標(biao)準品(pin)的(de)濃度(du)值為縱(zong)坐標(biao)，在(zai)坐標(biao)紙(zhi)上(shang)或(huo)用(yong)相(xiang)關(guan)軟(ruan)件繪(hui)制標(biao)準曲(qu)線，並得到(dao)直線(xian)回(hui)歸(gui)方(fang)程(cheng)，將樣品(pin)的(de)OD值代(dai)入(ru)方(fang)程(cheng)，計算(suan)出(chu)樣品(pin)的濃度(du)。

試(shi)劑盒(he)性能

1、檢測(ce)範圍：詳見產(chan)品(pin)說(shuo)明書(shu)。

2、靈(ling)敏度(du)：最di檢測(ce)濃度(du)小於0.1 U/L。

3、特(te)異(yi)性：不與其(qi)它(ta)可(ke)溶性結構(gou)類似(si)物交(jiao)叉(cha)反應。

4、重復(fu)性：板(ban)內(nei)變異(yi)系(xi)數小於10% ，板間(jian)變異(yi)系(xi)數小於15% 。