牛(niu)病(bing)毒性(xing)腹(fu)瀉病(bing)毒(du)抗體(ti)(p80)競爭ELISA檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒說明(ming)書(shu)

產(chan)品(pin)名稱

中(zhong)文(wen)名稱：牛(niu)病(bing)毒性(xing)腹(fu)瀉病(bing)毒(du)抗體(ti)(p80)競(jing)爭(zheng) ELISA 檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒

英(ying)文(wen)名稱：Bovine Viral Diarrhea virus (p80) Competitive ELISA antibody test kit

作(zuo)用與(yu)用(yong)途

通(tong)過(guo)檢(jian)測(ce)牛(niu)血(xue)清樣(yang)品(pin)中(zhong)的(de)牛(niu)病(bing)毒性(xing)腹(fu)瀉病(bing)毒(du)抗體(ti)水(shui)平(ping)。

試(shi)劑(ji)盒組成(cheng)

操作(zuo)步(bu)驟(zhou)與判(pan)定(ding)

1.操作(zuo)步(bu)驟(zhou)

1. 1 試(shi)劑(ji)準備：20X 洗(xi)滌(di)液(ye)需用(yong)蒸餾(liu)水(shui)或去離(li)子水(shui)稀(xi)釋成(cheng) 1X 洗(xi)滌(di)液(ye)（即 1 份(fen) 20X 洗(xi)滌(di)液(ye)加入(ru) 19 份(fen)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)）。

1.2 實驗準(zhun)備(bei)：取出(chu)包被板，記錄(lu)好樣(yang)本(ben)的(de)位置(zhi)。如需使(shi)用(yong)部分板條(tiao)，則將需要的(de)板條(tiao)拆(chai)下進(jin)行實驗，將剩(sheng)余(yu)的(de)板條(tiao)置於 2-8℃幹(gan)

燥(zao)保(bao)存。

1.3 加(jia)樣(yang)/對照：分別(bie)將 20µl 待檢(jian)樣品(pin)和陰、陽(yang)性(xing)對照加入(ru)到(dao)抗原包被板孔內，其中(zhong)陰、陽(yang)性(xing)對照各加 2 孔(kong)；註(zhu)意每個(ge)樣品(pin)使用(yong)不(bu) 同(tong)的(de)吸頭(tou)。

1.4 加(jia)酶：每(mei)孔加入(ru) 80ul 酶標抗(kang)體 ，輕(qing)輕(qing)振蕩(dang)混勻 ，封(feng)板後(hou)置(zhi)於 37℃溫(wen)育(yu) 30 分(fen)鐘(zhong)。

1.5 洗(xi)滌(di)：棄去孔內液(ye)體 ，每(mei)孔(kong)加入(ru) 300µl 1X 洗(xi)滌(di)液(ye) ，洗(xi)滌(di) 4 次 ，在(zai)最後(hou)壹(yi)次 1X 洗(xi)滌(di)液(ye)棄去後(hou) ，將孔中(zhong)殘(can)留的(de) 1X 洗(xi)滌(di)液(ye)拍幹(gan)。

1.6 顯(xian)色(se)：每(mei)孔(kong)先(xian)加入(ru) 50µl 底(di)物(wu) A 液(ye) ，再(zai)加(jia)入(ru) 50µl 底(di)物(wu) B 液(ye) ，輕(qing)輕(qing)振蕩(dang)混勻 ，封(feng)板後(hou)置(zhi)於 37℃溫(wen)育(yu) 15 分(fen)鐘(zhong)。

1.7 終(zhong)止(zhi)：每孔加(jia)入(ru) 50µl 終(zhong)止(zhi)液(ye) ，輕(qing)輕(qing)振蕩(dang)混勻 ，測(ce)定 OD450nm波(bo)長處(chu)各孔的(de)吸光值(zhi)。

2.判(pan)定(ding)

2. 1 實驗成(cheng)立(li)條(tiao)件 ：陰性(xing)對照 OD450nm 平(ping)均(jun)值(zhi)-陽(yang)性(xing)對照 OD450nm 平(ping)均(jun)值(zhi)≥0.3。

如果(guo)實驗結(jie)果(guo)不(bu)成(cheng)立(li) ，有(you)可(ke)能是實驗操作(zuo)失誤造(zao)成(cheng)的(de) ，應(ying)按(an)操作(zuo)步(bu)驟(zhou)進(jin)行重(zhong)復(fu)實驗。

2.2 S/N 值(zhi)=    陰性(xing)對照 OD450nm 均(jun)(待測(ce)樣品(pin) OD450nm 值(zhi))值(zhi)    

2.3 結(jie)果(guo)判(pan)定(ding) ：S/N 值(zhi)≥0.3 ，判(pan)為(wei)陰性(xing)； S/N 值(zhi)＜0.3 ，判(pan)為(wei)陽(yang)性(xing)。

3.註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)

3. 1 試(shi)劑(ji)盒嚴(yan)禁(jin)凍(dong)結 ，試(shi)劑(ji)盒從(cong) 2-8℃冰(bing)箱(xiang)中(zhong)取出(chu)後(hou)需(xu)室(shi)溫(wen)放置(zhi) 30 分(fen)鐘(zhong)以上 ，完(wan)quan恢(hui)復(fu)至室溫方可(ke)使用(yong) ，使(shi)用(yong)後(hou)應(ying)立(li)即密封放(fang)置

2-8℃保(bao)存。

3.2 使(shi)用(yong)前需確認試(shi)劑盒有(you)效(xiao)期 ，應(ying)在(zai)有效(xiao)期內使用(yong)。

3.3 所(suo)有(you)試劑嚴(yan)禁(jin)接(jie)觸皮膚(fu)和粘膜(mo) ，檢(jian)測(ce)結束(shu)後(hou)所(suo)用(yong)耗(hao)材按(an)國家規(gui)定(ding)進(jin)行無(wu)害(hai)化處(chu)理(li)。

3.4 底(di)物(wu) B 溶液(ye)變藍，則(ze)不(bu)能使用(yong)。

3.5 每(mei)個(ge)血(xue)清樣(yang)品(pin) 1 個(ge)吸(xi)頭(tou) ，避免(mian)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染。

3.6 待檢(jian)血(xue)清樣(yang)品(pin)數量較多(duo)時(shi) ，應(ying)盡(jin)量縮(suo)短(duan)加樣(yang)時(shi)間(jian)。

3.7 終(zhong)止(zhi)反應(ying)後(hou)立(li)即(ji)用(yong)酶標儀(yi)讀數(shu)，應(ying)在(zai) 10 分(fen)鐘(zhong)內完(wan)成(cheng)。

3.8 所(suo)有(you)樣品(pin)、洗滌(di)液(ye)和各種廢棄物都應(ying)滅活(huo)處理(li)。

3.9 嚴(yan)格(ge)按(an)照實驗操作(zuo)步(bu)驟(zhou)操作(zuo)。

3. 10 僅用於科(ke)研或(huo)遵(zun)守(shou)當地法(fa)律(lv)法規(gui)。

規(gui)格(ge)

1*96T/盒 ，2*96T/盒 ，5*96T/盒

貯藏條(tiao)件及有(you)效期

2～8℃保(bao)存 ，有(you)效(xiao)期為 12 個(ge)月(yue)。

僅供科(ke)研使(shi)用