產品簡介(jie)

非洲豬(zhu)瘟(ASFV)核(he)酸(suan)試劑(ji)盒(熒(ying)光(guang)-PCR法)是我司(si)實(shi)時熒(ying)光(guang)探針法(fa)試劑(ji)盒,種(zhong)類(lei)齊(qi)全(quan),精(jing)準高(gao)效，現(xian)貨(huo)供(gong)應(ying),歡迎(ying)廣大(da)新老(lao)客戶前來選(xuan)購。

【產品名稱】

商(shang)品名(ming)稱：非洲豬(zhu)瘟(ASFV)核(he)酸(suan)試劑(ji)盒(熒(ying)光(guang)-PCR法)

【包裝(zhuang)規(gui)格】25T/盒、50T/盒

【檢驗原理(li)】本試劑(ji)盒采用(yong)TaqMan 探(tan)針法(fa)實(shi)時熒(ying)光(guang)PCR 技術(shu)，根(gen)據(ju) 非洲豬(zhu)瘟(ASFV)基(ji)因設計(ji)特異性引物(wu)和熒(ying)光(guang)探針，用(yong)熒(ying)光(guang)PCR技術(shu)對(dui)非洲豬(zhu)瘟(ASFV)的核(he)酸(suan)進(jin)行體外擴增檢測(ce)，用(yong)於(yu)臨(lin)床上(shang)對(dui)可疑(yi)感染病料(liao)的病原(yuan)學(xue)診(zhen)斷(duan)。

【試劑(ji)組(zu)成(cheng)】

說明：不(bu)同批號的試劑(ji)盒組分(fen)不(bu)可交互(hu)使(shi)用(yong)

【儲(chu)存(cun)條件及(ji)有(you)效(xiao)期】

 -20℃±5℃，避光(guang)保存(cun)、運(yun)輸、反復凍融(rong)次數(shu)不(bu)超過(guo) 5 次，有(you)效(xiao)期 12 個月。

【適(shi)用(yong)儀器(qi)】 ABI7500、安(an)捷(jie)倫(lun) MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR 檢測(ce)儀。

【使(shi)用(yong)方(fang)法】

1.樣(yang)品處(chu)理(li)（樣(yang)本處理(li)區）

 核(he)酸(suan)提(ti)取 推(tui)薦采用核(he)酸(suan)提(ti)取或純(chun)化(hua)試劑(ji)（磁(ci)珠法或離心(xin)柱(zhu)法(fa)）進(jin)行核酸(suan)提(ti)取， 請(qing)按(an)照(zhao)試劑(ji)說明書進(jin)行操作(zuo)。

2.試劑(ji)配(pei)制（試劑(ji)準(zhun)備區）根(gen)據(ju)待(dai)檢測(ce)樣(yang)本總數，設(she)所(suo)需(xu)要(yao)的PCR 反應管管數(shu)為(wei) N(N=樣(yang)本數+1 管陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)+1 管陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)；反應管數(shu)每(mei)滿(man)10 份，多配(pei)制1 份)，每(mei)測(ce)試反應體(ti)系配(pei)制如(ru)下表：

將(jiang)混(hun)合好(hao)的測(ce)試反應液(ye)分(fen)裝(zhuang)到(dao) PCR 反應管中(zhong)，20μL/管。

3.加(jia)樣(yang)（樣(yang)本處理(li)區）將(jiang)步(bu)驟 1 提(ti)取的核(he)酸(suan)、陽(yang)性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin)、陰性質(zhi)控(kong)品(pin)各(ge)取5μL，分(fen)別(bie)加(jia)入相(xiang)應的反應管中(zhong)，蓋(gai)好(hao)管蓋(gai)，混(hun)勻，短(duan)暫(zan)離心(xin)。

4.PCR 擴增（核(he)酸(suan)擴增區）

2.1 將(jiang)待(dai)檢測(ce)反應管置(zhi)於(yu)熒(ying)光(guang)定量(liang) PCR 儀反應槽(cao)內(nei)；

2.2 設(she)置(zhi)好(hao)通道(dao)、樣(yang)品信(xin)息(xi)，反應體(ti)系設置(zhi)為(wei) 25μL；熒(ying)光(guang)通道(dao)選(xuan)擇：檢測(ce)通(tong)道(dao)（Reporter Dye）FAM，淬(cui)滅(mie)通道(dao)（Quencher Dye）NONE，ABI 系(xi)列儀器(qi)請(qing)勿(wu)選(xuan)擇 ROX 參比(bi)熒(ying)光(guang)，選(xuan)擇 None 即(ji)可。

2.3 推(tui)薦循環參數(shu)設(she)置(zhi)：

5.結(jie)果分(fen)析(xi)判(pan)定

5.1結(jie)果分(fen)析(xi)條件設(she)定（請(qing)參照(zhao)各(ge)儀器(qi)使(shi)用(yong)說明書進(jin)行設置(zhi)，以(yi)分(fen)析(xi) ABI7500 儀器(qi)為(wei)例(li)） 反應結(jie)束後自動(dong)保存(cun)結(jie)果，根據(ju)分(fen)析(xi)後(hou)圖像(xiang)調(tiao)節 Baseline 的 Start 值(zhi)、End 值(zhi)以(yi)及(ji) Threshold 值(zhi)（用(yong)戶可根 據(ju)實際情(qing)況自行調整(zheng)，Start 值(zhi)可設在 3～15、End 值(zhi)可設在 5～20，使(shi)閾(yu)值(zhi)線(xian)位(wei)於(yu)擴增曲線(xian)指(zhi)數期，陰(yin)性(xing)質(zhi)控(kong) 品(pin)的擴增曲線(xian)平(ping)直或低(di)於(yu)閾(yu)值(zhi)線(xian)），點擊 Analyze 自動(dong)獲得分(fen)析(xi)結(jie)果。

5.2結(jie)果判斷(duan)

陽(yang)性(xing)：檢測(ce)通(tong)道(dao)Ct 值(zhi)≤40，且(qie)曲線(xian)有(you)明顯的指(zhi)數增長(chang)曲線(xian)；

陰(yin)性(xing)：樣(yang)本檢測(ce)結(jie)果無Ct 值(zhi)，且(qie)無(wu)特異性擴增曲線(xian)；

可疑(yi)：樣(yang)本檢測(ce)結(jie)果40＜Ct 值(zhi)≤45，建(jian)議(yi)重復檢測(ce)，如(ru)果檢測(ce)通(tong)道(dao)仍為(wei)40值(zhi)≤45，且(qie)曲線(xian)有(you)明顯的增長(chang) 曲線(xian)，判(pan)定為(wei)陽性，否(fou)則為陰性。

5.3 質(zhi)控(kong)標(biao)準 陰(yin)性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin)：無特異性擴增曲線(xian)或(huo)無Ct 值(zhi)顯(xian)示；陽性質(zhi)控(kong)品(pin)：擴增曲線(xian)有(you)明顯指數(shu)增長(chang)期，且(qie) Ct 值(zhi)≤32；以(yi)上(shang)條件應(ying)同(tong)時(shi)滿(man)足(zu)，否則實驗視為(wei)無效。

3. 檢測(ce)方(fang)法的局(ju)限(xian)性

1. 樣(yang)本檢測(ce)結(jie)果與(yu)樣(yang)本收(shou)集、處(chu)理(li)、運(yun)送以(yi)及(ji)保存(cun)質(zhi)量有(you)關(guan)；

2. 樣(yang)本提取過程(cheng)中沒(mei)有(you)控(kong)制好(hao)交叉(cha)汙(wu)染，會出(chu)現(xian)假陽(yang)性(xing)結(jie)果；

3. 陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)、擴增產物(wu)泄漏，會導(dao)致(zhi)假陽(yang)性(xing)結(jie)果；

4. 病原(yuan)體在(zai)流行過程(cheng)中(zhong)基因突(tu)變(bian)、重組(zu)，會導(dao)致(zhi)假陰(yin)性(xing)結(jie)果；

5. 不(bu)同的提(ti)取方(fang)法存(cun)在提(ti)取效率(lv)差異，會導(dao)致(zhi)假陰(yin)性(xing)結(jie)果；

6. 試劑(ji)運(yun)輸，保(bao)存(cun)不(bu)當或(huo)試劑(ji)配(pei)制不(bu)準確(que)引(yin)起(qi)的試劑(ji)檢測(ce)效(xiao)能下降(jiang)，出現假陰(yin)性(xing)或定量(liang)檢測(ce)不(bu)準確(que)的結(jie)果；

7. 本檢測(ce)結(jie)果僅(jin)供(gong)參考，如(ru)須確(que)診(zhen)請(qing)結(jie)合臨(lin)床癥(zheng)狀以(yi)及(ji)其他(ta)檢測(ce)手(shou)段(duan)。

【非洲豬(zhu)瘟(ASFV)核(he)酸(suan)試劑(ji)盒(熒(ying)光(guang)-PCR法)註(zhu)意(yi)事項(xiang)】

1.所(suo)有(you)操(cao)作(zuo)嚴(yan)格按(an)照(zhao)說明書進(jin)行；

2.試劑(ji)盒內(nei)各(ge)種(zhong)組(zu)分(fen)使(shi)用(yong)前應自然(ran)融(rong)化(hua)，完quan混(hun)勻並短(duan)暫(zan)離心(xin)；

3.反應液(ye)應避光(guang)保存(cun)；

4.反應中(zhong)盡量避免氣泡(pao)存(cun)在，管蓋(gai)需(xu)蓋(gai)緊；

5.使(shi)用(yong)壹(yi)次性(xing)吸頭(tou)、壹(yi)次性(xing)手套(tao)和各(ge)區專(zhuan)用(yong)工作(zuo)服；

6.樣(yang)本處理(li)、試劑(ji)配(pei)制、加(jia)樣(yang)需(xu)在(zai)不(bu)同區進(jin)行，以(yi)免交叉(cha)汙(wu)染；

7.實(shi)驗完畢(bi)後用(yong) 10%次氯(lv)酸(suan)或(huo) 75%酒(jiu)精(jing)或紫外燈處理(li)工作(zuo)臺(tai)和移液器(qi)；

8.試劑(ji)盒裏(li)所(suo)有(you)物(wu)品應視(shi)為(wei)汙染物(wu)對(dui)待(dai)，並按(an)照(zhao)《微生物(wu)生物(wu)醫(yi)學(xue)實(shi)驗室生(sheng)物(wu)安全通(tong)則》進(jin)行處理(li)。

我司(si)的實(shi)時熒(ying)光(guang)探針法(fa)試劑(ji)盒種(zhong)類(lei)齊(qi)全(quan)（涵(han)蓋禽(qin)病、豬(zhu)病、馬(ma)牛(niu)羊病和水產動(dong)物(wu)病原(yuan)體檢測(ce)），精(jing)準高(gao)效，多(duo)重檢測(ce)（壹(yi)重(zhong)、雙(shuang)重(zhong)、三(san)重(zhong)），現(xian)貨(huo)供(gong)應(ying)歡迎(ying)廣大(da)新老(lao)客戶前來選(xuan)購。