氟喹諾酮(tong)類ELISA檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒操作步(bu)驟

氟喹諾酮(tong)類快(kuai)速(su)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒

使(shi)用(yong)說明書(shu)

       試(shi)劑盒采用(yong)間接競爭ELISA方法(fa)，在(zai)微孔條(tiao)上預(yu)包被(bei)偶(ou)聯(lian)抗(kang)原(yuan)，樣(yang)本(ben)中的(de)殘留物(wu)氟喹諾酮(tong)類和(he)微孔條(tiao)上預(yu)包被(bei)的(de)偶(ou)聯(lian)抗(kang)原(yuan)競爭抗(kang)氟喹諾酮(tong)類抗(kang)體，加(jia)入(ru)酶(mei)標(biao)記(ji)物(wu)後(hou)，用(yong)TMB底(di)物(wu)顯(xian)色，樣(yang)本(ben)吸(xi)光(guang)值(zhi)與其(qi)所(suo)含(han)殘留氟喹諾酮(tong)類的(de)含(han)量(liang)成負(fu)相(xiang)關(guan)，與標(biao)準(zhun)曲線(xian)比(bi)較(jiao)即可(ke)得(de)出(chu)相(xiang)應(ying)殘留物(wu)氟喹諾酮(tong)類的(de)含(han)量(liang)。

規       格：96孔(kong)/盒

靈(ling) 敏 度(du)：0.5ppb

檢(jian)測(ce)時(shi)間： 45min

交(jiao)叉(cha)反(fan)應(ying)率(lv)：

環丙沙(sha)星(xing)（CIF）…………………………100％

恩諾沙(sha)星(xing)（ENR）…………………………75%

氧氟沙(sha)星(xing)（OFL）………………………… 99％

奧(ao)索(suo)利酸(suan)（OXO）………………………116％

達(da)氟沙(sha)星(xing)（DAN）…………………………65％

諾(nuo)氟沙(sha)星(xing)（NOR）……………………… 198％

洛美沙(sha)星(xing)（LOM）……………………… 86％

培(pei)氟沙(sha)星(xing)（PEF）…………………………56％

沙(sha)拉(la)沙(sha)星(xing)（Sarafloxacin）……………190％

依(yi)諾(nuo)沙(sha)星(xing)（ENO）…………………………98％

氟喹(kui)酸(suan)（FLU）…………………………… 96％

麻(ma)保沙(sha)星(xing)（MAR）……………………… 110％

氨氟沙(sha)星(xing)（AMI）…………………………98％

那氟沙(sha)星(xing)（NAD）…………………………56％

樣(yang)本(ben)回(hui)收(shou)率：

組(zu)   織(zhi)…………………………………80±15%

血   清…………………………………80±15%

蜂(feng)   蜜(mi) ……………………………… 75±15%

氟喹諾酮(tong)類檢(jian)測(ce)下限(xian)分(fen)別(bie)為：

環丙沙(sha)星(xing)（CIF） 檢(jian)測(ce)下限(xian)…………………………0.5ppb

恩諾沙(sha)星(xing)（ENR）檢(jian)測(ce)下限(xian)……………………約(yue)1ppb

氧氟沙(sha)星(xing)（OFL）檢(jian)測(ce)下限(xian)………………………約(yue)0.5ppb

達(da)氟沙(sha)星(xing)（DAN）檢(jian)測(ce)下限(xian)………………………約(yue)1ppb

諾(nuo)氟沙(sha)星(xing)（NOR）檢(jian)測(ce)下限(xian)……………………約(yue)0.25 ppb

洛美沙(sha)星(xing)（LOM）檢(jian)測(ce)下限(xian)………………………約(yue)0.5ppb

培(pei)氟沙(sha)星(xing) （PEF）檢(jian)測(ce)下限(xian)……………………約(yue)0.25ppb

沙(sha)拉(la)沙(sha)星(xing)檢(jian)測(ce)下限(xian)………………………………約(yue)0.55ppb

依(yi)諾(nuo)沙(sha)星(xing)（ENO）檢(jian)測(ce)下限(xian)………………………約(yue)0.5ppb

奧(ao)索(suo)利酸(suan)（OXO）檢(jian)測(ce)下限(xian)………………………約(yue)0.5ppb

氟喹酸　（FLU）檢(jian)測(ce)下限(xian)………………………約(yue).5ppb

麻(ma)保沙(sha)星(xing)（MAR）檢(jian)測(ce)下限(xian)………………………約(yue)0.5ppb

氨氟沙(sha)星(xing)（AMI）檢(jian)測(ce)下限(xian)………………………約(yue)0.5ppb

那氟沙(sha)星(xing)（NAD）檢(jian)測(ce)下限(xian)………………………約(yue)1ppb

【試(shi)劑盒組(zu)成】  

1、 微量(liang)測(ce)試(shi)孔：每條(tiao)8孔(kong)，壹(yi)板(ban)12條(tiao)

2、 標(biao)準(zhun)品溶(rong)液(ye)×6瓶(ping)：（1ml/瓶(ping)） 0ppb、0.5ppb、1.5 ppb、4.5ppb、13.5ppb、40.5ppb

3、 高(gao)濃度標(biao)準(zhun)品：×1瓶(ping)：（1ml/瓶(ping)） 1ppm

4、 抗(kang)體工(gong)作液(ye)         7 ml …………………………… 綠色(se)帽

5、 酶(mei)標(biao)記(ji)物(wu)             7 ml …………………………… 紅(hong)色(se)帽

6、 底(di)物(wu)A液(ye)             7ml………………………………棕(zong)色(se)帽

7、 底(di)物(wu)B液(ye)　         7ml………………………………黑(hei)色(se)帽

8、 終(zhong)止液(ye)                  7ml………………………………黃色帽

9、 20X濃縮(suo)洗(xi)滌液(ye)40 ml ……………………………白(bai)色帽

10、 2X濃縮(suo)復(fu)溶(rong)液(ye)    50 ml ……………………………藍色帽

【所(suo)用(yong)儀(yi)器(qi)、試(shi)劑】  

具備(bei)的(de)儀(yi)器(qi)：微孔酶(mei)標(biao)儀(yi)、打(da)印機、均質(zhi)器 、氮(dan)氣吹幹裝(zhuang)置(zhi)、振蕩器(qi)、離心(xin)機、刻(ke)度移液管、天平（感量(liang)0.01g）

微量(liang)移液器：單(dan)道(dao)20µl-200µl、100µl-1000µl，多(duo)道250µl

試(shi)         劑(ji)：濃鹽(yan)酸(suan)、二(er)氯(lv)甲(jia)烷、正(zheng)己(ji)烷、乙(yi)腈、肝(gan)素(su)鈉(na)

                    Na₂HPO₄·12H₂O、NaH₂PO₄·2H₂O、

【實(shi)驗前(qian)溶(rong)液配(pei)制】

配(pei)液1、0.1M HCL溶(rong)液(ye)  

860µl濃鹽(yan)酸(suan)加去離(li)子(zi)水(shui)100ml溶(rong)解(jie)。

配(pei)液2、乙(yi)腈-0.1MHCL溶(rong)液(ye)

V_乙(yi)腈：V_{0.1M –HCL} ＝ 84：16

配(pei)液3、乙(yi)腈-二(er)氯(lv)甲(jia)烷混(hun)合(he)溶(rong)液(ye)

V_乙(yi)腈-V_{二(er)氯(lv)甲(jia)烷}  =  1 : 4

配(pei)液4、pH7.2 0.05M PB緩沖液

12.9gNa₂HPO₄·12H₂O+2.175gNaH₂PO₄·2H₂O

            加(jia)去離子(zi)水(shui)1L溶(rong)解(jie)。

配(pei)液5、pH7.2  0.02MPB緩沖液

5.16gNa₂HPO₄·12H₂O+0.87g NaH₂PO₄·2H₂O

加(jia)去離子(zi)水(shui)1L溶(rong)解(jie)。

配(pei)液6、用(yong)去離子(zi)水(shui)將2X濃縮(suo)復(fu)溶(rong)液(ye)按1：1稀(xi)釋(shi)

（1份濃縮(suo)復(fu)溶(rong)液(ye)+1份去離子(zi)水(shui)）用於樣本復(fu)溶(rong)。

配(pei)液7：將(jiang)40ml濃縮(suo)洗(xi)滌液(ye)（20倍(bei)濃縮(suo)）用(yong)去離子(zi)水(shui)按(an)照(zhao)1：19

              稀(xi)釋(shi)（1份濃縮(suo)洗(xi)滌液(ye)+19份去離子(zi)水(shui)），或按所(suo)需(xu)用(yong)量(liang)

              配(pei)制洗(xi)滌液(ye)。

【樣(yang)本(ben)前(qian)處理(li)步驟(zhou)】  

樣(yang)本(ben)前(qian)處理(li)須(xu)知(zhi)    處理(li)任何(he)樣(yang)本時(shi)，都必須(xu)註(zhu)意(yi)：

（1）本(ben)試(shi)劑盒所(suo)檢(jian)測(ce)的(de)組(zu)織(zhi)樣本(ben)包(bao)括(kuo)：動(dong)物組(zu)織(zhi)、禽(qin)類(lei)和(he)水產(chan)組(zu)織(zhi)。eg:雞(ji)、鴨(ya)、牛(niu)、兔(tu)、魚(yu)、蝦(xia)、蛋類等。

（2）實(shi)驗中必須(xu)使(shi)用(yong)壹(yi)次(ci)性吸(xi)頭(tou)，在吸(xi)取不同試(shi)劑時(shi)要(yao)更(geng)換(huan)吸(xi)頭(tou)。

（3）實(shi)驗之(zhi)前(qian)須(xu)檢(jian)查(zha)各種實(shi)驗器(qi)具是(shi)否(fou)幹凈，必要(yao)時(shi)可(ke)對(dui)實(shi)驗器(qi)具進行(xing)清潔(jie)，以避(bi)免(mian)汙(wu)染(ran)幹擾(rao)實(shi)驗結(jie)果(guo)。

（a）組(zu)織(zhi)/蛋(dan)類(lei)樣本(ben)（雞肉/肝(gan)、豬(zhu)肉/肝(gan)、蝦(xia)、魚(yu)、蛋(dan)類等）

1、 稱2.0±0.05g 均(jun)質(zhi)樣本(ben)於50ml離(li)心(xin)管中；

2、 加(jia)入(ru)乙(yi)腈-二(er)氯(lv)甲(jia)烷混(hun)合(he)溶(rong)液(ye)8ml，振蕩5min，4000r/min以上(shang)，15℃離(li)心(xin)10min；

3、 取4ml清澈(che)有(you)機相至幹燥溶(rong)器(qi)中，56℃氮(dan)氣吹幹/旋(xuan)轉蒸發(fa)至幹；

4、 用(yong)1ml稀(xi)釋(shi)後的(de)復(fu)溶(rong)液(ye)溶解(jie)幹燥的(de)殘留物(wu)，加(jia)入(ru)正(zheng)己烷1ml混(hun)合(he)30s，4000r/min以上(shang)，15℃離(li)心(xin)5min；

5、 去除(chu)上層取下層(ceng)50µl液(ye)體用(yong)於(yu)分析(xi)。

        樣(yang)本(ben)稀釋(shi)倍(bei)數(shu)：1

（b） 組(zu)織(zhi)/蛋(dan)類(lei)低檢(jian)測(ce)限(xian)處理(li)方法(fa)二(er)

1、稱取2.0±0.05g均(jun)質(zhi)過的(de)組(zu)織(zhi)樣本(ben)於(yu)50ml離(li)心(xin)管中；加(jia)入4ml 0.02M  PB緩沖液，充(chong)分振蕩2min，於(yu)15℃，4000r/min以上(shang)速(su)度(du)離心(xin)10min

2、取50µl液(ye)體與450µl稀(xi)釋(shi)後的(de)復(fu)溶(rong)液(ye)

2、取50µl液(ye)體用(yong)於(yu)分析(xi)。

樣(yang)本(ben)稀釋(shi)倍(bei)數(shu)：20倍(bei)

（c）血清樣(yang)本(ben)的(de)處理(li)

1、 用(yong)加(jia)有(you)肝(gan)素(su)鈉(na)（20-30單(dan)位/ml血）的(de)離(li)心(xin)管采(cai)集(ji)血樣(yang)本(ben)（建議(yi)采(cai)血註(zhu)射器(qi)也(ye)用肝(gan)素(su)鈉(na)潤(run)洗(xi)），血樣(yang)本(ben)室溫(wen)靜(jing)置1h，待(dai)析(xi)出(chu)血漿後4000r/min以上(shang)，15℃離(li)心(xin)10min，取出(chu)血漿1ml；

2、 加(jia)入(ru)乙(yi)腈（無水）4ml上(shang)下(xia)充分(fen)混(hun)合(he)5min，4000r/min以上(shang)，15℃離(li)心(xin)10min；

3、 移上清至另壹離(li)心(xin)管中，加(jia)入2ml 0.02M PB緩沖液，混(hun)勻；

4、 加(jia)入(ru)二(er)氯(lv)甲(jia)烷5ml，充(chong)分(fen)混(hun)勻5min，4000r/min，15℃離(li)心(xin)10min，去上層(ceng)，取下層(ceng)有(you)機相到幹燥瓶(ping)中（清亮(liang)無雜(za)質(zhi)），50℃旋(xuan)轉蒸發(fa)至幹/氮(dan)氣吹幹；

5、 用(yong)1ml稀(xi)釋(shi)後的(de)復(fu)溶(rong)液(ye)溶解(jie)幹燥的(de)殘留物(wu)，加(jia)入(ru)正(zheng)己烷1ml混(hun)合(he)30s，4000r/min以上(shang)，15℃離(li)心(xin)5min；

6、 輕(qing)吸(xi)掉上(shang)層(ceng)和(he)中間(jian)白(bai)色雜(za)質(zhi)，取下層(ceng)相100µl加(jia)入(ru)100µl稀(xi)釋(shi)後的(de)復(fu)溶(rong)液(ye)，混(hun)合(he)30s；

7、 取50µl用(yong)於(yu)分析(xi)。

       樣(yang)本(ben)稀釋(shi)倍(bei)數(shu)：2

（d）蜂(feng)蜜(mi)高(gao)檢(jian)測(ce)限(xian)發(fa)法(fa)方法(fa)

1、 取1g蜂(feng)蜜(mi)，加(jia)６ml乙(yi)腈-0.1MHCL溶液振蕩至蜂蜜(mi)全(quan)部(bu)溶(rong)解(jie)；

2、 加(jia)入(ru)３ml 0.05M PB緩沖液，加(jia)入11ml二(er)氯(lv)甲(jia)烷，振蕩5min，4000r/min以上(shang)離(li)心(xin)5min；

3、 輕(qing)吸(xi)掉上(shang)層(ceng)，取下層(ceng)有(you)機相８ml至幹燥溶(rong)器(qi)中，56℃氮(dan)氣吹幹；

4、 用(yong)1ml稀(xi)釋(shi)後的(de)復(fu)溶(rong)液(ye)溶解(jie)幹燥的(de)殘留物(wu)，再加(jia)入(ru)正己(ji)烷1ml混(hun)合(he)30s，3000r/min以上(shang)，15℃離(li)心(xin)5min；

5、 去除(chu)上層取下層(ceng)50µl液(ye)體用(yong)於(yu)分析(xi)。

（e）蜂(feng)蜜(mi)低(di)檢(jian)測(ce)限(xian)發(fa)法(fa)方法(fa)

1、 稱取2±0.05g蜂(feng)蜜(mi)樣(yang)本(ben)於(yu)50ml離(li)心(xin)管中，加(jia)入4ml 0.02M  PB緩沖液充(chong)分振蕩2min，；

2、 取50µl與950µl已稀釋(shi)好(hao)的(de)復(fu)溶(rong)液(ye)復(fu)溶(rong)，混(hun)合(he)30s；

3、 取50µl液(ye)體用(yong)於(yu)分析(xi)。

樣(yang)本(ben)稀釋(shi)倍(bei)數(shu)：40倍(bei)

1、取出(chu)50μl 牛(niu)奶於另(ling)壹試(shi)管中，加(jia)入1950μl樣(yang)本(ben)稀釋(shi)液混(hun)30s；

2、取50µl液(ye)體用(yong)於(yu)分析(xi)。

樣(yang)本(ben)稀釋(shi)倍(bei)數(shu)：40倍(bei)

【酶(mei)標(biao)免(mian)疫分析(xi)程(cheng)序(xu)】  

操(cao)作步(bu)驟：

1、 將(jiang)試(shi)劑盒從冷藏(zang)環境中取出(chu)並(bing)將所(suo)需(xu)試(shi)劑從試(shi)劑盒取出(chu)，置(zhi)室溫(wen)（20-25℃）平衡(heng)30min以上(shang), 註(zhu)意(yi)每種液(ye)體試(shi)劑使(shi)用(yong)前(qian)均(jun)須(xu)搖勻。

2、 按(an)需(xu)要(yao)取出(chu)微孔條(tiao)及(ji)板(ban)架(jia)，將不用的(de)微孔板(ban)重新密(mi)封，保存(cun)於2-8℃，不要(yao)冷凍。

3、 編號：將(jiang)樣(yang)本(ben)和(he)標(biao)準(zhun)品對(dui)應(ying)微孔按(an)序編號，每個(ge)樣本(ben)和(he)標(biao)準(zhun)品均(jun)需(xu)做2孔(kong)平行(xing)，並記(ji)錄標(biao)準(zhun)孔的(de)樣(yang)本(ben)孔(kong)所(suo)在(zai)的(de)位置。

4、 加(jia)標(biao)準(zhun)品/樣(yang)本(ben)50µl /孔(kong)，然後加(jia)酶(mei)標(biao)記(ji)物(wu)50μl/孔(kong),再加(jia)入(ru)50µl/孔(kong)抗(kang)體工(gong)作液(ye)。輕(qing)輕(qing)振蕩混(hun)勻，用(yong)蓋(gai)板(ban)膜(mo)蓋(gai)板(ban)，25℃環境反(fan)應(ying)30min。

5、 取出(chu)用(yong)洗(xi)滌液(ye)按(an)每孔250μl洗(xi)板(ban)4-5次(ci)，每次(ci)浸泡15-30秒(miao)，拍幹（拍幹後(hou)未(wei)被(bei)清除(chu)的(de)氣泡可(ke)用(yong)幹凈的(de)槍(qiang)頭(tou)刺破(po)）。

6、 顯(xian)色(se)：每孔加(jia)入(ru)底(di)物(wu)液(ye)A液(ye)50µl再加(jia)B液(ye)50µl，輕(qing)輕(qing)振蕩混(hun)勻，25℃環境避光(guang)顯色(se)15min。

7、 測(ce)定：每孔加(jia)入(ru)終止液(ye)50µl，輕(qing)輕(qing)振蕩混(hun)勻，設(she)定酶標(biao)儀(yi)於(yu)450nm處（建(jian)議(yi)用(yong)雙波長(chang)450/630nm檢(jian)測(ce)在5min內(nei)讀(du)完(wan)數(shu)據(ju)），測(ce)定吸(xi)光(guang)度(du)值(zhi)（OD值(zhi)）。

【結(jie)果(guo)判(pan)定】  

     結(jie)果(guo)判(pan)定有(you)兩(liang)種(zhong)方法(fa)，粗略判(pan)定可(ke)用(yong)第(di)1種(zhong)方法(fa)，定量(liang)判(pan)定用第(di)2種(zhong)方法(fa)。註(zhu)意(yi)樣(yang)本吸(xi)光(guang)值(zhi)與氟喹諾酮(tong)類的(de)含(han)量(liang)成負(fu)相(xiang)關(guan)。

1、粗略判(pan)定

用(yong)樣(yang)本的(de)平均吸(xi)光(guang)度(du)值(zhi)與標(biao)準(zhun)品比(bi)較(jiao)即可(ke)得(de)出(chu)其(qi)濃度範圍(ng/ml)。假(jia)設樣(yang)本(ben)1的(de)吸(xi)光(guang)度(du)值(zhi)為(wei)0.238， 樣(yang)本(ben)2的(de)吸(xi)光(guang)度(du)值(zhi)為(wei)0.946，標(biao)準(zhun)液吸(xi)光(guang)度(du)值(zhi)分(fen)別(bie)是：0ppb為(wei)1.845；0.5ppb為(wei)1.542；1.5ppb為(wei)1.130； 4.5ppb為(wei)0.635；13.5ppb為(wei)0.326； 40.5ppb為(wei)0.156。則(ze)樣(yang)本(ben)1的(de)濃度範圍是13.5ppb-40.5ppb；樣(yang)本(ben)2的(de)濃度範圍是1.5ppb-4.5ppb。乘(cheng)以其(qi)對(dui)應(ying)的(de)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu)即為樣本中氟喹諾酮(tong)類的(de)實(shi)際濃度。

2、定量(liang)分析(xi)

（1）百(bai)分(fen)吸(xi)光(guang)率(lv)的(de)計(ji)算，標(biao)準(zhun)品或(huo)樣(yang)本(ben)的(de)百(bai)分(fen)吸(xi)光(guang)率(lv)等(deng)於(yu)標(biao)準(zhun)品或(huo)樣(yang)本(ben)的(de)百(bai)分(fen)吸(xi)光(guang)度(du)值(zhi)的(de)平均值(zhi)（雙孔）除(chu)以第(di)壹(yi)個(ge)標(biao)準(zhun)（0標(biao)準(zhun)）的(de)吸(xi)光(guang)度(du)值(zhi)，再乘(cheng)以100%，即(ji)

B—標(biao)準(zhun)溶液(ye)或(huo)樣(yang)本溶液(ye)的(de)平均吸(xi)光(guang)度(du)值(zhi)

B₀—0ng/ml標(biao)準(zhun)溶液(ye)的(de)平均吸(xi)光(guang)度(du)值(zhi)

（2）標(biao)準(zhun)曲線(xian)的(de)繪(hui)制(zhi)與計(ji)算

以標(biao)準(zhun)品百(bai)分(fen)吸(xi)光(guang)率(lv)為(wei)縱(zong)坐標(biao)，以氟喹諾酮(tong)類標(biao)準(zhun)品濃度（ng/ml）的(de)半對(dui)數(shu)為(wei)橫坐標(biao)，繪(hui)制(zhi)標(biao)準(zhun)曲線(xian)圖。將(jiang)樣本的(de)百(bai)分(fen)吸(xi)光(guang)率(lv)代入標(biao)準(zhun)曲線(xian)中，從標(biao)準(zhun)曲線(xian)上讀(du)出(chu)樣(yang)本所(suo)對(dui)應(ying)的(de)濃度，乘(cheng)以其(qi)對(dui)應(ying)的(de)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu)即為樣本中氟喹諾酮(tong)類的(de)實(shi)際濃度。

若利用(yong)試(shi)劑盒專業(ye)分析(xi)軟件(jian)進行(xing)計(ji)算，更(geng)便(bian)於(yu)大量(liang)樣本(ben)的(de)準(zhun)確、快(kuai)速(su)分(fen)析。（歡(huan)迎(ying)來電索(suo)取）

3、標(biao)準(zhun)準(zhun)曲線(xian)：

B/B0 (%)

          0.5                1.5                  4.5                  13.5                40.5

(ppb) [µg/kg]

圖1：氟喹(kui)諾(nuo)酮(tong)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒的(de)回(hui)歸(gui)曲線(xian)

4、再現(xian)性：

%CV

        0       0.5      1.5      4.5     13.5     40.5

(ppb) [µg/kg]

圖2：氟喹(kui)諾(nuo)酮(tong)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒的(de)精(jing)密(mi)度

由(you)多(duo)個(ge)不同的(de)實(shi)驗結(jie)果(guo)確定了(le)精密(mi)度，圖2顯(xian)示出(chu)喹(kui)諾(nuo)酮(tong)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒的(de)精(jing)密(mi)度情(qing)況，獲得的(de)標(biao)準(zhun)吸(xi)收(shou)值的(de)變(bian)異(yi)系數(shu)（%CV）對(dui)相(xiang)應(ying)喹(kui)諾(nuo)酮(tong)濃度作曲線(xian)，可(ke)以看(kan)到在(zai)全(quan)部(bu)範圍內(nei)變(bian)異系數(shu)如此之(zhi)低，可(ke)以得(de)到(dao)很(hen)好的(de)再現(xian)性。

【註(zhu)意(yi)事項(xiang)】  

1、 使(shi)用(yong)前(qian)將(jiang)所(suo)有(you)試(shi)劑溫(wen)度(du)回(hui)升(sheng)至室溫(wen)20-25℃。試(shi)劑及(ji)標(biao)本(ben)沒有(you)回(hui)到(dao)室溫(wen)（20-25℃）會(hui)導致所(suo)有(you)標(biao)準(zhun)的(de)OD值(zhi)偏(pian)低。

2、 在(zai)洗(xi)板(ban)過(guo)程中如(ru)果(guo)出(chu)現(xian)板(ban)孔(kong)幹燥的(de)情(qing)況(kuang)，則(ze)會(hui)伴隨著出(chu)現(xian)標(biao)準(zhun)曲線(xian)不成線(xian)性，重復(fu)性不好的(de)現(xian)象(xiang)。所(suo)以洗(xi)板(ban)拍幹後(hou)應(ying)立即(ji)進行(xing)下壹(yi)步操作。

3、 混(hun)合(he)要(yao)均(jun)勻，否(fou)則(ze)會(hui)出(chu)現(xian)重復(fu)性不好的(de)現(xian)象(xiang)。

4、 反(fan)應(ying)終(zhong)止液(ye)為2M硫(liu)酸(suan)，避免(mian)接觸(chu)皮膚。

5、 不要(yao)使(shi)用過了(le)有(you)效(xiao)日(ri)期(qi)的(de)試(shi)劑盒，稀釋(shi)或攙雜(za)使用(yong)會引起(qi)靈(ling)敏度、OD值(zhi)的(de)變(bian)化(hua)。不要(yao)交(jiao)換使用(yong)不同批(pi)號的(de)盒中試(shi)劑。

6、 不用的(de)微孔板(ban)放(fang)進自封袋密(mi)封；標(biao)準(zhun)物質(zhi)和(he)無色的(de)發(fa)色劑(ji)對光敏感，因(yin)此(ci)要(yao)避(bi)免直接暴(bao)露(lu)在光線(xian)下。

7、 顯(xian)色(se)液若有(you)任何(he)顏(yan)色(se)表(biao)明變(bian)質(zhi)，應(ying)當棄(qi)之(zhi)。0標(biao)準(zhun)的(de)吸(xi)光(guang)度(du)值(zhi)小(xiao)於0.5個(ge)單位（A_450nm< 0.5 ）時(shi)，表(biao)示試(shi)劑可(ke)能(neng)變(bian)質(zhi)。

8、 該(gai)試(shi)劑盒最佳(jia)反(fan)應(ying)溫(wen)度(du)為(wei)25℃，溫(wen)度(du)過(guo)高(gao)或(huo)過低(di)將(jiang)導致檢(jian)測(ce)吸(xi)光(guang)度(du)值(zhi)和(he)靈(ling)敏度發(fa)生變(bian)化。

【儲(chu)存(cun)】

原(yuan)包(bao)裝(zhuang)應(ying)儲(chu)存於2～8℃保鮮(xian)冷藏(zang)，切(qie)勿(wu)冷凍。

【有(you)效(xiao)期(qi)】

有(you)效(xiao)期(qi)12個(ge)月;生(sheng)產(chan)日(ri)期(qi)、有(you)效(xiao)期(qi)、生產批(pi)號見外(wai)包裝(zhuang)。